[发明专利]一种可以检测胃癌、肝癌、结肠癌的组合物

摘要

本发明公开的一种可以检测胃癌、肝癌、结肠癌的组合物，作为抗体载体参加免疫浊度反应，可用于检测多种肿瘤，大大提高了检测的灵敏度。所述可以检测多种肿瘤的组合物，是由多种识别肿瘤特异性抗原的抗体、聚合物、胶体金溶液组成；其制备方法为：将所述多种识别肿瘤特异性抗原的抗体分别用胶体金标记后，与所述聚合物形成包含多种胶体金标记的用于识别不同肿瘤特异性抗原的抗体的共聚物，再作为抗体载体参加免疫浊度反应，用于检测多种肿瘤的免疫增强体外诊断试剂，可检测多种肿瘤，具有普遍适用性，且检测的灵敏度较高。

主权项

1.一种可以检测多种肿瘤的组合物，其特征在于，是由多种识别肿瘤特异性抗原的抗体、聚合物、胶体金溶液组成；其制备方法为：将所述多种识别肿瘤特异性抗原的抗体分别用胶体金标记后，与所述聚合物形成包含多种胶体金标记的用于识别不同肿瘤特异性抗原的抗体的共聚物；将所述包含多种胶体金标记的用于识别不同肿瘤特异性抗原的抗体的共聚物作为抗体载体参加免疫浊度反应，可作为检测多种肿瘤的免疫增强体外诊断试剂；所述聚合物为可生物降解的聚合物；所述可生物降解的聚合物选自聚羟基醋酸、聚羟基丁酸酯、乳酸‑聚乙二醇共聚物、聚乳酸‑聚乙二醇嵌段共聚物或聚羟基烷基醇酯中的任意一种；所述肿瘤包括胃癌、肝癌、结肠癌；所述用于识别胃癌特异性抗原的抗体为抗S100P蛋白多克隆抗体；所述用于识别肝癌特异性抗原的抗体为人肝癌组织AFU多克隆抗体；所述用于识别结肠癌特异性抗原的抗体为结肠癌抗原3抗体；所述纳米金标记的识别肿瘤特异性抗原的抗体共聚物制备方法为：(1)制备胶体金溶液：用质量百分比浓度为1％的柠檬酸三钠水溶液与质量百分比浓度为0.01％氯金酸水溶液，按1.5mL:100mL的体积比，将氯金酸溶液加热至沸腾，把柠檬酸三钠水溶液快速加入其中，搅拌反应至所得的反应液为酒红色，再加热10min，直至溶液透亮，冷至室温，然后用碳酸钾水溶液调节p值为6.5～7.0，即得胶体金溶液；(2)在步骤(1)所得的胶体金溶液中在磁力搅拌下缓慢加入浓度为10～30μg/mL的用于识别胃癌特异性抗原的抗体水溶液，混匀，37℃孵育30min，加封闭液继续37℃孵育22～23.5min，14000rpm，4℃条件下离心20～21min，去除上清液，稀释液重悬沉淀并洗涤一次，得到胶体金‑抗S100P蛋白多克隆抗体标记物Ⅰ；另取步骤(1)所得的胶体金溶液，加入浓度为10～50μg/mL的用于识别肝癌特异性抗原的抗体水溶液，按照上述制备胶体金‑抗S100P蛋白多克隆抗体标记物Ⅰ同样的操作方法，得到胶体金‑人肝癌组织AFU多克隆抗体标记物Ⅱ；另取步骤(1)所得的胶体金溶液，加入浓度为10～50μg/mL的用于识别结肠癌特异性抗原的抗体水溶液，按照上述制备胶体金‑抗S100P蛋白多克隆抗体标记物Ⅰ同样的操作方法，得到胶体金‑结肠癌抗原3抗体标记物Ⅲ；(3)将所述聚合物溶于二氯甲烷，加入上述步骤(2)制得的标记物Ⅰ、标记物Ⅱ、标记物Ⅲ，用超声波处理30～45s，得到胶体金标记的识别胃癌、肝癌、结肠癌三种肿瘤的特异性抗原的抗体共聚物；所述的胶体金‑抗S100P蛋白多克隆抗体标记物Ⅰ，按质量比计算，即胶体金:抗S100P蛋白多克隆抗体为5:0.21～0.22；所述的胶体金‑人肝癌组织AFU多克隆抗体标记物Ⅱ，按质量比计算，即胶体金:人肝癌组织AFU多克隆抗体为5:0.25～0.265；所述的胶体金‑结肠癌抗原3抗体标记物Ⅲ，按质量比计算，即胶体金:结肠癌抗原3抗体为5:0.23～0.245；所述超声波处理的频率为35～55KHz；所述封闭液为含牛血清蛋白的洗涤液，其质量浓度为0.3～0.65mg/mL。