[发明专利]一种匍匐筋骨草组织培养与快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种匍匐筋骨草组织培养与快速繁殖方法。包括：A，外植体选择：以生长健壮，无病虫害的植株做母株，剪取顶端幼嫩茎段作为外植体。B，外植体处理：先后用酒精和升汞溶液对外植体进行消毒处理。C，增殖：选择较为经济的6‑苄基嘌呤（6‑BA）和萘乙酸（NAA）两种激素对外植体进行诱导增殖。D，生根和移栽：增殖芽体剥离转至生根培养基，待根系发育良好后开瓶炼苗，洗净培养基，于泥炭与珍珠岩混合基质中种质。该方法操作简单，原材料经济实惠，可在短时间获得大量组培苗，供园林绿化应用。

主权项

1.一种匍匐筋骨草组织培养与快速繁殖方法，其特征在于，包括如下几个步骤：A. 外植体的选择预处理：选择生长健壮，无病虫害的植株作为取材母株，剪取顶端幼嫩茎段，去掉叶片，只保留茎干，置于自来水中冲洗半小时；B. 外植体消毒处理：将上述清洗过的外植体置于70‑75%酒精中，摇动30秒，倒掉酒精，并用灭菌水清洗1遍，然后将外植体置于0.1%升汞溶液中，摇动8‑10分钟，倒掉升汞溶液，并立即用灭菌水冲洗4‑5遍，每遍3‑4分钟，倒掉灭菌水，外植体备用；C. 培养基配制：基本培养基为通用MS培养基，接种外植体用培养基含30g/L蔗糖，8g/L琼脂粉，1.5‑2.0 mg/L 6‑BA，0.1‑0.3 mg/L NAA，用1mol/L的氢氧化钠溶液调整培养基pH值至5.7‑6.0，121℃ ，0.105MPa条件下，灭菌25‑30分钟，培养基分装放凉备用；D. 外植体接种：将步骤B处理完毕的外植体用灭菌剪刀剪成长1厘米的茎段，保证每个茎段上至少含有一个叶腋，然后按照生长极性插入步骤C配好的培养基中，密封，置于70‑80μE/（m2·s）光照条件下，光照周期为16小时/天，培养温度为24℃±1℃；E. 继代和生根培养：外植体在初次培养时，经过40‑50天从基部不经过愈伤，直接分化出新芽，待新芽长至2‑3厘米时，将新芽分离，置于新配制的原培养基中增殖，每30‑40天继代培养一次；生根培养基配方是1/2MS培养基，含30g/L蔗糖，以及8g/L琼脂粉，将增殖培养后的新芽接种于生根培养基，平均25‑30天根系发育完成，即可炼苗移栽；F. 炼苗移栽：完成生根培养的无菌苗，先移到温室大棚，打开瓶盖一半，使无菌苗与外界环境相适应，两天后，将无菌苗连同生根培养基取出，洗掉培养基，修剪无菌苗基部叶片，准备移栽，移栽基质采用细泥炭和珍珠岩按照体积比3:1混合，先将含水量质量百分比80%的基质装填入穴盘，然后将洗净的无菌苗移入基质，种植完毕喷淋浇水，塑料薄膜覆盖保湿，20‑30℃之间缓苗，15天即可成活并撤掉覆盖物。