[发明专利]一种简便的低内毒素鲍曼不动杆菌荚膜多糖提取方法

摘要

本发明涉及一种简便的低内毒素鲍曼不动杆菌荚膜多糖提取方法，属于生物材料制备技术领域；本发明所述方法首先采用裂解液和超声法共同破裂鲍曼不动杆菌，再使用CTAB溶液第一次去除细菌脂多糖等内毒素，再分别使用25%乙醇和80%乙醇沉淀已获得的鲍曼不动杆菌荚膜多糖，以进一步去除细菌脂多糖和核酸等杂质，最终获得低内毒素含量的鲍曼不动杆菌荚膜多糖；本发明建立了一套简便、快速、廉价的鲍曼不动杆菌荚膜多糖提取方法，其内毒素低，可以用于体内试验研究。

主权项

一种简便的低内毒素鲍曼不动杆菌荚膜多糖提取方法，其特征在于，所述方法按照如下步骤进行：（1）细菌培养：在羊血琼脂平板上培养鲍曼不动杆菌；（2）细菌收集：离心收集菌体沉淀，弃去上清，细菌沉淀中加细菌裂解液；（3）破碎菌体：超声法破裂鲍曼不动杆菌，得到细菌裂解上清液；（4）去除内毒素：在将细菌裂解上清液中加入适量CTAB溶液，充分搅拌混匀后，室温下静置以形成沉淀；离心收集沉淀；向沉淀物中加入CaCl2溶液，使用电磁搅拌仪搅拌直至沉淀重新溶解，离心收集上清液；（5）沉淀荚膜多糖：在上清液中加入乙醇，4℃中静置过夜，离心收集上清；次日在上清液中加入冰上预冷的乙醇，在室温下充分混匀使荚膜多糖沉淀，离心收集荚膜多糖沉淀，使用无水乙醇洗涤荚膜多糖沉淀，即得鲍曼不动杆菌荚膜多糖。