[发明专利]一种慢病毒工作液及利用其调控鸭产蛋性能的方法

摘要

本发明涉及一种慢病毒工作液，以及利用其调控鸭产蛋性能的方法，本发明人利用特异性小RNA核糖核酸序列，并包装成慢病毒感染载体，注射到北京鸭腹腔近卵巢部位，能够干扰正处在产蛋期北京鸭的产蛋量，在注射后第二周产蛋量下降10％‑12％左右，反之在蛋鸭停产期到来之前通过表达将其包装成表达载体，能够延长北京鸭的停产期到来的时间。该慢病毒工作液，即可实现对于产蛋鸭产蛋性能的调控，达到产蛋期缩短或延长的效果，较传统方法需测定多个世代完整的产蛋记录并计算育种值进行选育改良的方法，当代就可以实现产蛋性能的改良，可明显节约鸭产蛋性能选育改良的工作量。

主权项

一种慢病毒工作液，其特征在于，由如下步骤制备而成：(1)感染或表达载体质粒构建：以小RNA序列或表达RNA序列为基础序列，合成到慢病毒表达质粒上，并利用慢病毒质粒U6启动子通用测序引物进行测序，对测序正确包含小RNA序列或表达RNA序列的重组质粒，进行无内毒素提取、纯化，得到不含内毒素的重组质粒；(2)慢病毒包装纯化：将步骤(1)制得的重组质粒和慢病毒包装质粒混匀，共转染293T细胞，进行病毒包装，收集病毒液，测定滴度，对收集的病毒液滴度不足109的利用慢病毒浓缩实际盒进行浓缩、纯化；(3)扩繁与病毒定量：用纯化后的病毒液感染293T细胞，并通过定量PCR精确测定病毒滴度，将病毒液稀释调正到109滴度形成工作液；步骤(1)中，所述小RNA序列为：5’GGAGTAATCCCAAGAGCAAAC’3；步骤(1)中，所述表达RNA序列如Seq ID NO.1所示。