[发明专利]一种诱导上皮组织分化的蛋白肽交联膜及其制备方法

摘要

本发明公开了一种诱导上皮组织分化的蛋白肽交联膜，蛋白肽交联膜以罗非鱼皮为原料，采用酸法制备胶原，酶法制备胶原肽，将胶原、胶原肽、交联剂按照体积质量比1％0.1％1％～1％0.5％2％比例在1体积纯水中混合,室温反应1.5～3h，经过干燥、清洗、二次干燥、灭菌步骤即得到蛋白肽交联膜产品。该蛋白肽交联膜表面多孔，且分布均匀，耐水耐热，有利于上皮细胞快速粘附和生长，可应用于皮肤创口愈合和细胞组织工程培养。

主权项

一种诱导上皮组织分化的蛋白肽交联膜及其制备方法，其特征在于：所述蛋白肽交联膜以罗非鱼皮为原料，经酸法制备的胶原、经酶法制备的胶原肽，再将得到的胶原、胶原肽与交联剂交联，交联后所得物质再经过干燥、清洗、二次干燥、灭菌步骤后，得到诱导上皮组织分化的蛋白肽交联膜,制备步骤包括：A.酸法制备胶原步骤，以罗非鱼皮作为原料，经过酸法工艺将罗非鱼皮制备成胶原；B.酶法制备胶原肽步骤，以罗非鱼皮为原料，通过在酸法制备得到的罗非鱼皮胶原中加入商业酶水解获得的胶原酶解液，经超滤分离，干燥得到酶法制备的胶原肽；C.交联步骤，将经过酸法制备的胶原、酶法制备的胶原肽与交联剂混合；D.交联后所得物质再经过干燥、清洗、二次干燥、灭菌步骤后，得到诱导上皮组织分化的蛋白肽交联膜；所述酶法制备胶原肽步骤中的超滤是将胶原酶解液通过分子膜进行分离获得1ku～5ku组分；所述酶法制备胶原肽步骤中的商业酶为中性蛋白酶、胶原酶和碱性蛋白酶；所述酶法制备胶原肽步骤中的干燥采用真空冷冻干燥；所述交联步骤中的交联剂是指将碳化二亚胺(EDC)和N‑羟基琥珀酰亚胺(NHS)按质量比为0.23:0.056～1.61:0.39混合，得到EDC/NHS交联剂；所述交联步骤中，胶原、胶原肽与交联剂混合的比例为在1体积纯水中，酸法制备的胶原、酶法制备的胶原肽、EDC/NHS交联剂按照质量百分比1％：0.1％:0.3％～1％:0.5％:2％混合；所述的交联步骤中的混合是指将胶原、胶原肽与交联剂在混合过程中于300rpm/min匀速搅拌1.5～3h，得到混合溶液；所述的干燥步骤，是指将交联步骤得到的混合溶液进行冻干或自然晾干，得到交联膜；所述清洗步骤，是指经干燥得到的交联膜用纯水连续冲洗三次；所述的二次干燥步骤，是指将清洗后的交联膜于40℃热风干燥；所述的灭菌步骤，是指干燥后的交联膜正反两面用紫外光照灭菌30～45min,于无菌条件下保存。