[发明专利]丹参组织培养中愈伤组织诱导工艺

摘要

本发明公开了丹参组织培养中愈伤组织诱导工艺，包括外植体取样、外植体消毒、外植体处理、外植体接种、外植体培养等步骤，与现代组织培养中愈伤组织诱导培养相比，本发明的优势在于，本发明通过优化丹参组织培养过程中愈伤组织的诱导工艺，提高丹参外植体愈伤组织诱导速率、长势、质地等；NAA和2,4‑D浓度降低，有利于愈伤组织诱导率增加，培养条件优化，愈伤组织增值生长旺盛，整体愈伤组织诱导技术工艺优化，使得诱导出的愈伤组织质地紧密，颜色黄绿色，用来转接继代培养比较适合。

主权项

丹参组织培养中愈伤组织诱导工艺，其特征在于，包括以下步骤：1)外植体取样：取丹参嫩幼叶片，进行筛分，通过清洗设备对丹参嫩幼叶片进行清理，后用纯水冲洗干净；2)外植体消毒：冲洗干净的外植体放置于75％酒精中浸泡10‑20s，匀速震荡，接着转入无菌水中冲洗3次，再用0.1％升汞浸泡消毒4‑6min，过程中继续震荡，然后转入无菌水中冲洗3‑5遍；3)外植体处理：将消毒后的丹参叶片外植体放置于无菌接种盘上，用无菌解剖针固定，经无菌解剖刀片切成小碎片，避开叶柄和主叶脉；4)外植体接种：采用无菌镊子将上述小碎片镊起，放置于MS固体培养基上，其培养基成分为MS+1.0mg/L 6‑BA+0.8mg/L NAA+0.8mg/L 2,4‑D+30g/L蔗糖+5.26g/L琼脂，pH5.8，高压灭菌；5)外植体培养：接种后的外植体放置于培养箱中进行愈伤组织诱导，15天后开始统计愈伤组织诱导率、质地、颜色和生长情况。