[发明专利]一种快速核酸检测肺炎支原体及耐药突变的方法和试剂盒有效

专利信息
申请号: 201710480826.6 申请日: 2017-06-22
公开(公告)号: CN107254524A 公开(公告)日: 2017-10-17
发明(设计)人: 苑鑫;柏长青;牛文凯;崔茜;李璞嫒;刘慧莹;冯羽中;郑敬;苏海峰;吴国君 申请(专利权)人: 中国人民解放军第三〇七医院;北京百康芯生物科技有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/35
代理公司: 深圳市科吉华烽知识产权事务所(普通合伙)44248 代理人: 谢肖雄
地址: 100089*** 国省代码: 北京;11
权利要求书: 暂无信息 说明书: 暂无信息
摘要: 发明基于荧光PCR技术对肺炎支原体及耐药突变进行快速检测。属于分子生物学领域。本发明通过针对肺炎支原体23S rRNA基因设计引物,并针对23S rRNA2063位点设计专用引物检测支原体是否存在耐药突变。具体来说检测耐药突变的上游引物3’末端设计在2063位点,并将末端三个碱基硫化。原理为在发生错配时,高保真酶无法对硫化碱基发挥5’至3’核酸外切酶活性,使3’末端无法延伸。从而判定支原体是够存在耐药突变。本发明操作简单,反应时间短。为临床提供一种简单迅速的检测肺炎支原体及耐药突变的方法。
搜索关键词: 一种 快速 核酸 检测 肺炎 支原体 耐药 突变 方法 试剂盒
【主权项】:
一种快速核酸检测肺炎支原体及耐药突变的试剂,其特征在于:所述试剂包括第一试剂和第二试剂,所述第一试剂和第二试剂中均由体系液和引物组成,所述体系液中含有终浓度为以下的各物质:1×Q5 Buffer、200μM dNTP、EVAGREEN 0.6μM、1×ROX、BSA 0.2‑0.8 mg/mL、甜菜碱 0.2‑0.8 M、Q5高保真酶0.1‑0.5 U/μL、纯水,所述第一试剂中含有肺炎支原体检测引物,所述第二试剂中含有耐药性检测引物。
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