[发明专利]一种两段式补料发酵合成微生物油脂的方法

摘要

本发明公开一种两段式补料发酵合成微生物油脂的方法，在发酵培养基中加入糖作为碳源，然后接入浅白隐球菌种子液进行发酵培养，控制发酵罐转速100‑900转/分钟，发酵温度20‑30℃，pH 5‑7，直至溶解氧浓度和pH值上升；当糖浓度为1‑5g/L时，开始流加挥发性脂肪酸混合液代替糖作为碳源，同时实施氮源限制。每当挥发性脂肪酸混合液浓度在1‑5g/L之间，流加挥发性脂肪酸混合液直至总挥发性脂肪酸浓度至5‑20g/L。本发明具有微生物代谢挥发性脂肪酸的速率较高，高浓度有机酸碳源对细胞生长抑制作用小，从而使得最终得到的细胞浓度和产物浓度都较高的优点。本发明可有效帮助降低微生物油脂的生产成本。

主权项

一种两段补料式发酵合成微生物油脂的方法，其特征在于：制备方法如下：(1)：首先在发酵培养基中加入20‑50g/L的糖作为碳源，然后接入浅白隐球菌种子液于发酵培养基中并在发酵罐中进行发酵培养，控制发酵罐的搅拌转速为100‑900转/分钟，以0.5‑1.5vvm的流量将无菌空气连续通入发酵罐内，并保持溶解氧浓度在10‑40％，发酵温度为20‑30℃，并调节pH为5.0‑7.0；随时监控发酵过程中溶解氧浓度、pH值和碳源浓度的变化；(2)：当溶解氧浓度和pH值同时迅速上升且糖浓度为1‑5g/L时，开始流加挥发性脂肪酸混合液代替糖作为碳源；同时，利用不含氮的碱性溶液来调节pH值，并停止补加氯化铵和其它含氮物质，使发酵液中的氮含量逐渐降低至0.01g/L，造成发酵液中氮源供给不足实现氮限制，每当挥发性脂肪酸混合液浓度为1.0‑5.0g/L时，流加挥发性脂肪酸混合液直至碳源总浓度在5‑20g/L，微生物会将发酵液中的挥发性脂肪酸通过代谢合成转化为生物油脂。