[发明专利]一种肥胖相关基因的检测方法

摘要

本发明公开了一种肥胖相关基因的检测方法，具体步骤如下利用检测者的口腔黏膜细胞提取DNA；以口腔黏膜细胞提取DNA为模板进行PCR反应；对肥胖6个相关基因设计了6对特异性引物；进行普通PCR扩增后将PCR扩增产物用1％的琼脂糖凝胶电泳；将1％的琼脂糖凝胶电泳目的条带用天跟的琼脂糖凝胶回收试剂盒回收；进行测序反应；测序反应产物纯化；变性，上3730测序仪测序；将测序结果用Chromas软件分析6个SNP基因型。本发明具有检测高效、特异性好等优点。

主权项

一种肥胖相关基因的检测方法，其特征在于：具体步骤如下：一、利用检测者的口腔黏膜细胞提取DNA；二、分别用SEQ NO 1和SEQ NO 2为引物扩增FTO基因SNP rs9939609位点，用SEQ NO 3和SEQ NO 4为引物扩增PPARG基因SNP rs1801282位点，用SEQ NO 5和SEQ NO 6为引物扩增LIPC基因SNP rs1800588位点，用SEQ NO 7和SEQ NO 8为引物扩增ADRB3基因SNP rs4994位点，用SEQ NO 9和SEQ NO 10为引物扩增APOA5基因SNP rs662799位点，用SEQ NO 11和SEQ NO 12为引物扩增APOA2基因SNP rs5082位点，以口腔黏膜细胞提取DNA为模板进行PCR反应；三、将上述6对引物进行普通PCR扩增后PCR扩增产物用1％的琼脂糖凝胶电泳；四、将1％的琼脂糖凝胶电泳目的条带用天跟的琼脂糖凝胶回收试剂盒回收目的条带；五、进行测序反应；六、测序反应产物纯化：测序反应产物中加3ul EDTA和18ul无水乙醇，3700r/min，离心30min，后倒置800r/min离心10s后取出加50ul 80％乙醇，3700r/min，离心15min，后倒置800r/min离心10s取出；七、变性，上3730测序仪测序：在上一步测序反应产物纯化后的样本中加10ul去离子甲酰胺，上PCR仪变性，94℃条件下变性2min，4℃保存3min后上3730测序；八、将测序结果用Chromas软件分析6个SNP基因型。