[发明专利]庆大霉素1‑癸醇混配杀线虫剂及其制备方法

摘要

本发明涉及一种庆大霉素1‑癸醇混配杀线虫剂及其制备方法。庆大霉素1‑癸醇混配杀线虫剂的制备方法包括制备海洋放线菌液态发酵培养基、发酵培养、发酵液处理和制备杀线虫剂。本发明利用1‑癸醇对松材线虫具有活性和单独使用的效果差的特点，将1‑癸醇与微生物混合培养，改变微生物生长环境，改变其次级代谢产物，进而增强了其杀线活性。利用本发明的方法制备的庆大霉素1‑癸醇混配杀线虫剂，可用于防治植物线虫。

主权项

一种庆大霉素1‑癸醇混配杀线虫剂的制备方法，其特征在于步骤如下：（1）配制海洋放线菌液态发酵培养基：在1000ml的水中加入可溶性淀粉20g、 酵母粉5g、 K2HPO4·3H2O 0.58g、NaCl 0.81g、MgSO4· 7H2O 0.72g、CaCO3 0.28g、FeSO4· 7H2O 0.01g、10% 的1‑癸醇500ul、重量比为0.03% 无菌庆大霉素3ml，调pH 7.2‑7.5；所述10%的1‑癸醇，指1‑癸醇与水的体积比为10%；（2）发酵培养：按体积比为6%的接种量，在步骤（1）的培养基中接种海洋放线菌菌株EX‑10‑2711，培养温度32℃，转速145 rpm，发酵时间96 h，获得发酵液；（3）发酵液处理：将步骤（2）的发酵液分装于无菌50ml大离心管中，离心1‑3次，每次5000 rpm/min离心10min，分离获得上清和沉淀；a) 上清，4℃保存备用；b) 沉淀，用无菌水洗涤3次后，将离心洗涤后的细胞团与3倍体积的无菌1% NaCl混匀，于560W和工作时间/间隔时间为5s的条件下在超声波破碎仪中冰浴破碎5min，破碎后5000rpm 离心10min去沉淀，取上清液4℃保存备用；（4）制备杀线虫剂：合并步骤（3）二次获得的上清液，即为庆大霉素1‑癸醇混配的杀线虫剂。