[发明专利]一种大米中黄曲霉毒素B1的胶体金免疫层析检测方法

摘要

本发明公开了一种大米中黄曲霉毒素B1(AFB1)的胶体金免疫层析检测方法，包含以下步骤采用还原法还原HAuCl4水溶液制备胶体金，将胶体金与抗AFB1单克隆抗体混合均匀，得金标AFB1单克隆抗体作为分析探针；将检测线AFB1‑BSA偶联物和质控线羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维素膜上，建立AFB1的胶体金免疫层析检测体系(GICA)；将大米样品溶液缓慢滴加于分析探针上，观察检测线和质控线的颜色变化，当样品中AFB1浓度低于限值时，检测线和质控线均为红色；高于限值时，仅质控线为红色；本发明的胶体金免疫层析技术作为一种新型检测技术，无需借助仪器，具有操作简单、快速，检测结果及时、准确等优点，适用于对AFB1进行现场检测，在食品安全检测领域具有广阔的应用前景。

主权项

一种大米中黄曲霉毒素B1的胶体金免疫层析检测方法，其特征在于，所述方法包含以下步骤：(1)抗AFB1单克隆抗体的制备与纯化：将稳定分泌抗AFB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株2A5接种于BALB/c小鼠腹腔，通过体内诱生制备抗AFB1的腹水抗体，然后将所述腹水抗体采用亲和层析纯化得高纯度的抗AFB1单克隆抗体；(2)胶体金免疫层析检测体系的制备：采用还原剂还原HAuCl4水溶液制备胶体金，将所述胶体金与所述步骤(1)中抗AFB1单克隆抗体混合均匀得金标AFB1单克隆抗体，作为分析探针；将作为检测线的AFB1‑BSA偶联物和作为质控线的羊抗鼠IgG分别包被在硝酸纤维素膜上，建立AFB1的胶体金免疫层析检测体系；(3)大米样品溶液AFB1的检测：制备大米样品溶液，缓慢滴加于所述步骤(2)中分析探针上，依据检测条件，观察检测线和质控线的颜色变化，当样品中AFB1浓度低于限值时，检测线和质控线均为红色；高于限值时，仅质控线为红色。