[发明专利]一种南方红豆杉组织培养种苗繁育方法

摘要

本发明公开了一种南方红豆杉组织培养种苗繁育方法，其技术方案要点是步骤为选取外植体，将外植体置于培养基中进行培养，选取外植体后，再将外植体置于培养基内之前，对外植体进行消毒处理；所选取的外植体中，导管尚未发育成熟，为活细胞，能够分裂增殖，其木薄壁组织对外植体的难以起到阻碍分裂的作用。将外植体消毒能够有效去除外植体表面的细菌，减小细菌污染培养基的可能性；同时，不对外植体进行搅碎的操作，能够减少破碎细胞的数量，以便降低细菌污染外植体的可能性，在后期的培养中，细菌的数量少，难以对培养基中的外植体起到污染、损害的作用，以利于外植体正常增殖，提高了实验成功的可能性，利于大批量商业化生产。

主权项

一种南方红豆杉组织培养种苗繁育方法，其特征在于：步骤为：选取外植体，对外植体进行表面消毒，接种到启动培养基中并给以合适的环境条件进行启动培养，转接到增殖培养基中并给以合适的培养条件进行腋芽增殖培养，对增殖腋芽进行分割并转接到壮苗培养基中给以合适培养条件进行壮苗培养，将经过壮苗培养的无根组培苗接种到生根培养基中并给予合适的培养条件进行生根诱导，所剪取的外植体保留有外植体的高增殖能力；筛选剪取外植体包括如下步骤：S1：选取外植体并对外植体消毒所需的苗木个体为生长年限为3～4年之间的健壮苗木个体，该苗木无病虫害、无机械损伤、无叶片畸形；S2：选取苗木个体于春季自然萌发的嫩梢，所述嫩梢中木质素低于20%，所述嫩梢中的导管分子处于发育初期，为活细胞状态；S3：所选取的嫩梢长度在5cm至10cm之间；S4：所述嫩梢生长于靠近苗木个体主干处的叶片呈螺旋状排列的枝条上；消毒处理包括如下步骤：S1：采用酒精棉擦拭外植体表面；S2:剪取擦拭过的外植体，所述外植体带有叶片、嫩芽；S3：将剪取的外植体置于流水下冲洗0.5h～1h；S4：将冲洗后的外植体置于超净工作台中，采用医用酒精消毒10～60S；S5：将采用酒精消毒后的外植体采用无菌水冲洗2～4遍；S6：将冲洗后的外植体采用漂白水消毒30 min～60min，所述漂白水由一份体积的商品漂白水添加四份体积的无菌水勾兑配置而成；S7：将漂白水消毒后的外植体采用无菌水冲洗3～4次。