[发明专利]一种数字PCR芯片信号读取方法

摘要

本发明提供一种数字PCR芯片信号读取方法，包括：将反应溶液加入若干个反应芯片中；对各反应芯片进行扩增；获取各反应芯片的荧光试剂图像；对各荧光试剂图像进行归一化处理；读取各反应芯片中的有效孔数目，获得总有效孔数目；读取各反应芯片中位孔内部的荧光强度，并建立荧光直方图；根据所述荧光直方图设置各反应芯片的阳性判定阈值，获取总阳性位点数目；根据总阳性位点数目和总有效孔数目的比值，计算待测样本溶液的浓度。本发明的扩增系统与检测系统能够和现有微孔芯片式数字PCR技术完全兼容，通过多次成像的方式获取多张扩增后的芯片荧光图像，对扩增芯片图像进行直方图、散点图分析获得高通量的数字PCR检测结果，提高检测精度。

主权项

一种数字PCR芯片信号读取方法，其特征在于，所述数字PCR芯片信号读取方法至少包括：步骤S1：将反应溶液加入若干个反应芯片中，所述反应芯片的数量不少于2个；步骤S2：将各反应芯片加入PCR扩增仪中进行扩增；步骤S3：将各反应芯片放置于荧光成像系统中，获取各反应芯片的荧光试剂图像；步骤S4：对各反应芯片的荧光试剂图像进行归一化处理；步骤S5：根据各反应芯片的荧光试剂图像读取各反应芯片中的有效孔数目，并将有效孔数目进行累加以获得总有效孔数目；步骤S6：根据各反应芯片的荧光试剂图像读取各反应芯片中位孔内部的荧光强度，并建立荧光直方图；步骤S7：根据所述荧光直方图设置各反应芯片的阳性判定阈值，获取各反应芯片中阳性位点的数目，对阳性位点的数目进行累加以得到总阳性位点数目；步骤S8：根据总阳性位点数目和总有效孔数目的比值，利用泊松方程计算所述反应溶液中的待测样本溶液的浓度。