[发明专利]一种可再生的用于痕量银离子检测的葡萄糖氧化酶SERS传感芯片及其制备方法

摘要

一种可再生的用于痕量银离子检测的葡萄糖氧化酶SERS传感芯片及其制备方法，属于SERS检测技术领域。是首先在支持基底通过组装方法实现金属纳米粒子和葡萄糖氧化酶(GOD)的高效固定；银离子通过配位作用结合在葡萄糖氧化酶的辅酶因子FAD的N‑5和C‑4上的羰基氧之间，导致葡萄糖氧化酶的结构发生变化，在激光照射下，其SERS信号发生了明显的改变(包括峰位移的改变以及某些峰的逐渐出现和消失)，银离子浓度越高，1629cm

主权项

1.一种可再生的用于痕量银离子检测的葡萄糖氧化酶SERS传感芯片的制备方法，其步骤如下：/n1)银纳米粒子的合成：称取硝酸银粉末0.017～0.019g，溶解于100mL二次去离子水中，搅拌并加热至100～120℃；当溶液微沸时加入1.9～2.1mL质量分数为1％的柠檬酸钠溶液，溶液由无色逐渐变为微黄色、深黄色，最后变为灰绿色，此时将温度降至80～95℃，保持此温度冷却回流30～40min，得到表面带负电的银纳米粒子溶液；/n2)清洗玻璃片：将玻璃片依次用去离子水、乙醇、丙酮、氯仿、丙酮、乙醇和去离子水超声清洗，每次清洗时间为5～10min；/n3)玻璃片的羟基化：将清洗干净的玻璃片置于羟基化的溶液中，待无气泡产生后将其加热煮沸，直到溶液中完全没有气泡冒出时停止加热；然后将玻璃片用大量去离子水多次清洗去除残余的羟基化溶液，得到带负电的羟基化玻璃片；/n4)组装银纳米粒子：将带负电的羟基化玻璃片浸入带正电的聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液中，组装时间为30～50min，聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液的浓度为1～3mg/mL；取出玻璃片后用大量去离子水冲洗，用氮气吹干；再将玻璃片浸入到表面带负电的银纳米粒子溶液中进行组装，组装时间为11～12h，取出玻璃片后用去离子水洗净，氮气吹干；从而在玻璃片表面组装一层致密的灰绿色薄膜，即银纳米粒子组装膜，膜的厚度范围是1～2nm；/n5)组装葡萄糖氧化酶：将上述组装银纳米粒子膜的玻璃片浸入到聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液中，组装时间为30～40min，聚二甲基二烯丙基氯化铵溶液的浓度为1～3mg/mL；然后取出该玻璃片用PBS溶液冲洗，氮气吹干；再将该玻璃片浸入到葡萄糖氧化酶水溶液中，组装时间为3～4h；最后取出玻璃片用大量的PBS溶液冲洗，氮气吹干，从而制备得到可再生的用于痕量银离子检测的葡萄糖氧化酶SERS传感芯片；/n6)传感芯片的多次重复利用：将检测完银离子的传感芯片浸入硼氢化钠溶液中，硼氢化钠还原银离子生成零价银从而恢复葡萄糖氧化酶的SERS信号，使得该传感芯片能够被多次重复利用。/n