[发明专利]一种利用光引发RAFT聚合原位诱导自组装制备蛋白质基纳米粒子的方法

摘要

一种利用光引发RAFT聚合原位诱导自组装制备蛋白质基纳米粒子的方法。本发明属于生物高分子材料领域，具体涉及一种利用光引发RAFT聚合原位诱导自组装制备蛋白质基纳米粒子的方法。本发明是为了解决现有方法无法实现蛋白质纳米粒子构筑的同时又保持了构筑基元蛋白质的催化活性的问题。方法：一、PBS缓冲溶液的配制；二、制备蛋白质大分子链转移剂；三、光引发RAFT水相聚合诱导蛋白质原位自组装。本发明采用光引发RAFT水相聚合的方法，诱导蛋白质原位自组装，提供了一种操作简单、反应条件温和、不破坏蛋白质催化活性、适用范围广和高效率的蛋白质纳米粒子的制备方法。

主权项

1.一种利用光引发RAFT聚合原位诱导自组装制备蛋白质基纳米粒子的方法，其特征在于利用光引发RAFT聚合原位诱导自组装制备蛋白质基纳米粒子的方法具体是按以下步骤进行的：一、PBS缓冲溶液的配制：将NaH2PO4和Na2HPO4混合溶解在去离子水中配制成PBS缓冲溶液；所述NaH2PO4与Na2HPO4的质量比为1:(10～12.5)；所述PBS缓冲溶液的浓度为45mmol/L～55mmol/L，pH值为7.4～7.6；二、制备蛋白质大分子链转移剂：将牛血清白蛋白溶解在步骤一得到的PBS缓冲溶液中，得到牛血清白蛋白磷酸缓冲液；将α‑端巯基噻唑啉酯活化的RAFT试剂溶于二甲基亚砜中，得到RAFT溶液；在磁力搅拌条件下将RAFT溶液逐滴滴加到牛血清白蛋白磷酸缓冲液中，反应10h～24h后透析2d，冷冻干燥，得到蛋白质大分子链转移剂固体粉末；所述牛血清白蛋白磷酸缓冲液的浓度为1.5mg/mL～2.4mg/mL；所述α‑端巯基噻唑啉酯活化的RAFT试剂的质量与二甲基亚砜的体积比为1mg:(0.4～5)mL；三、光引发RAFT水相聚合诱导蛋白质原位自组装：将步骤二得到的蛋白质大分子链转移剂固体粉末配置成浓度为2mg/mL～10mg/mL的蛋白质大分子链转移剂水溶液，向浓度为2mg/mL～10mg/mL的蛋白质大分子链转移剂水溶液中依次加入甲基丙烯酸羟丙酯单体和浓度为1mg/mL的氯化三(2,2’‑联吡啶)钌水溶液，然后转移至反应器中，除去反应器中的氧气，在可见光LED灯的照射下进行聚合反应1h～12h，得到蛋白质基纳米粒子；所述甲基丙烯酸羟丙酯单体与浓度为2mg/mL～10mg/mL的蛋白质大分子链转移剂水溶液中溶质的质量比为1:(0.02～0.2)；所述浓度为2mg/mL～10mg/mL的蛋白质大分子链转移剂水溶液中溶质的质量与浓度为1mg/mL的氯化三(2,2’‑联吡啶)钌水溶液的体积比为1mg:(0.001～0.02)mL。