[发明专利]一种蜂胶中多酚类物质HPLC/Q‑TOF‑MS检测方法

摘要

本发明涉及一种蜂胶中多酚类物质HPLC /Q‑TOF‑MS检测方法，其方法如下取蜂胶原料用乙醇超声提取三次制得储备液，采用HPLC/Q‑TOF‑MS，取多酚类标准物共二十种，分别在指定色谱质谱条件测定每种多酚类标准物，确定每种多酚类标准物的离子化形式，形成多酚类物质数据库，通过自动匹配保留时间、准确质量数，鉴别蜂胶样品中存在的多酚类物质，确定蜂胶样品中二十种多酚类物质含量；本发明具有快速、高通量、高精度和高可靠性等优势，能够对蜂胶中主要多酚类物质进行准确筛查，为蜂胶提取物质量评价提供了一种手段，有利于进一步制定蜂胶提取物的质量监控标准。

主权项

一种蜂胶中多酚类物质HPLC/Q‑TOF‑MS检测方法，其特征为，其方法如下：（1）样品前处理：①取蜂胶原料，加入乙醇，超声处理，超声后取上清液用滤纸过滤，收集过滤清液和残留杂质；取残留杂质加入乙醇至浸润，超声处理后过滤，收集过滤清液和残留杂质，再重复此过程一次；合并过滤清液，蒸发回收，再采用烘箱烘烤干燥直至恒重，得到蜂胶乙醇提取物，随后将蜂胶乙醇提取物保存于冰箱直至使用；②取蜂胶乙醇提取物用乙醇配制成5 mg/ml的储备液；（2）利用HPLC/Q‑TOF‑MS技术进行定性和定量分析：采用HPLC/Q‑TOF‑MS，取多酚类标准物共二十种，分别在指定色谱质谱条件测定每种多酚类标准物，得到每种多酚类标准物的准分子离子质量数，与现有多酚类标准物的理论精确质量数对比，确定每种多酚类标准物的离子化形式，将每种多酚类标准物的保留时间、离子化形式、分子式、CAS号和准确质量数信息导入PCDL软件形成多酚类物质数据库；将（1）②储备液制得的储备液稀释得蜂胶样品，按指定液相色谱条件采用HPLC/Q‑TOF‑MS测定蜂胶样品，根据建立的多酚类物质数据库，自动匹配保留时间、准确质量数，鉴别蜂胶样品中存在的多酚类物质，通过标准曲线法进行外标法定量，确定蜂胶样品中二十种多酚类物质含量。