[发明专利]一种抑制侵染水稻PCD途径相关基因上调的方法在审
| 申请号： | 201710078834.8 | 申请日： | 2017-02-14 |
| 公开（公告）号： | CN106754614A | 公开（公告）日： | 2017-05-31 |
| 发明（设计）人： | 罗琼;杨静;王春梅;刘林;王云锋;张娅玲 | 申请（专利权）人： | 云南农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/36 | 分类号： | C12N1/36;C12N1/14;C12Q1/68;C12R1/645 |
| 代理公司： | 成都环泰知识产权代理事务所(特殊普通合伙)51242 | 代理人： | 邓瑞 |
| 地址： | 650000 云南*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种抑制侵染水稻PCD途径相关基因上调的方法，采用弱酸处理稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株孢子；用悬浮液喷雾接种水稻叶片；于不同时间点取样，提取水稻样品总RNA；反转录成cDNA，real‑time RT‑PCR检测cDNA；分析PCD途径相关的主要基因PR1a和PR5在不同时间点的表达。与现有技术相比，本发明克服了研究非生物环境pH影响寄主‑病原互作机制中，常借助温室设计各种弱酸处理以观察寄主表型变化、以及筛选大量水稻防御相关基因表达等周期长和效率低的弊端，提供了一种更为简便、有效、准确地弱酸处理病原菌孢子、定量检测水稻PCD途径主要相关基因表达的方法，为更快速准确地进行弱酸对水稻与稻瘟病菌互作机制的研究提供重要的实验依据。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抑制 侵染 水稻 pcd 途径 相关 基因 上调 方法 | ||
【主权项】：
一种抑制侵染水稻PCD途径相关基因上调的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采用弱酸pH4.6,pH5.0,pH5.2,pH5.5处理稻瘟菌效应蛋白基因过表达菌株孢子；(2)用悬浮液喷雾接种水稻叶片；(3)于0h,24h,48h,72h和96h五个时间点取样，提取水稻样品总RNA；(4)反转录成cDNA，real‑time RT‑PCR检测cDNA；(5)分析PCD途径相关的主要基因PR1a和PR5在不同时间点的表达。
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