[发明专利]一种高效烟草花粉活力检测方法

摘要

本发明提供一种高效烟草花粉活力检测方法，采用10％蔗糖+150mg/L硼酸+20mg/L氯化钙或3％葡萄糖+50mg/L硼酸+20mg/L氯化钙作为培养液，在25℃恒温培养箱内，暗箱保湿培养3h，根据花粉萌发生长出有效花粉管的情况，可以定量判断烟草花粉活力的大小。按照本发明检测鉴定烟草新鲜花粉活力可达86.8％、91.3％，非常接近新鲜花粉活力水平，是目前鉴定烟草花粉活力最有效、最可靠的检测方法。

主权项

一种高效烟草花粉活力检测方法，其特征在于，具体步骤如下：1)花粉萌发培养液的配制：配方一：分别取葡萄糖30g、硼酸50mg、氯化钙20mg用蒸馏水溶解，定溶于1L的定溶瓶中备用；配方二：分别取蔗糖100g、硼酸150mg、氯化钙20mg用蒸馏水溶解，定溶于1L的定溶瓶中备用；2)载玻片的制作：取1‑2滴培养液滴于凹形载玻片上，取少量待检花粉与培养液均匀混合，盖上盖玻片，每批次制作三个载玻片；3)花粉萌发培养：将步骤2)中载玻片，放入垫有湿滤纸的培养皿，再将培养皿置于25℃恒温培养箱内，暗箱保湿培养3h；4)花粉活力观察：将步骤3)中载玻片置于100倍三目生物显微镜下观察；每次观察4个视野，在每个视野内分别统计花粉粒总数和能够萌发并生长出有效花粉管的花粉粒数；5)花粉活力统计：计算步骤4)中每个载玻片各个视野观察到的能够萌发并生长出有效花粉管的花粉粒数的总和占各个视野观察到的花粉粒数总和的百分比，即得到每个载玻片的花粉活力，计算3个载玻片的花粉活力的平均值，即得到该批次烟草花粉活力；计算公式为：每个载玻片花粉活力％＝(∑每个视野能够萌发并生长出有效花粉管的花粉粒数/∑每个视野花粉粒总数)×100；每批次花粉的花粉活力％＝∑每个载破片花粉活力/3；所述花粉活力的强弱判别为：花粉活力小于或等于40％为花粉活力差；花粉活力大于40％，小于或等于60％为花粉活力较差；花粉活力大于60％，小于或等于80％为花粉活力中等；花粉活力大于80％为花粉活力强。