[发明专利]一种去除富硒茶蛋白中茶多糖、糖蛋白的方法

摘要

本发明涉及一种去除富硒茶蛋白中茶多糖、糖蛋白的方法，该方法包括富硒茶蛋白粗品石油醚脱色脱脂；调节pH溶解富硒茶蛋白，加入乙醇沉淀茶多糖、糖蛋白；离心、旋蒸浓缩；调节pH，Sepharose FF纯化；硫酸‑苯酚法结合分光光度法检测多糖及蛋白含量；3500Da半透膜透析，收集富硒茶蛋白冷冻干燥，得到不含茶多糖、糖蛋白的富硒茶蛋白精品。与现有技术相比，本发明提供一种去除富硒茶蛋白中茶多糖、糖蛋白的方法，能够获得不含茶多糖、糖蛋白的富硒茶蛋白，为富硒茶蛋白及其它蛋白的理化、生物活性研究提供物质基础。

主权项

一种去除富硒茶蛋白中茶多糖、糖蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)脱色脱脂：将富硒茶蛋白粗品脱色脱脂，得到脱色脱脂后的富硒茶蛋白粗品；(2)沉淀茶多糖、糖蛋白：向脱色脱脂后的富硒茶蛋白粗品中加入纯化水，调节pH使其完全溶解，然后加入乙醇，沉淀茶多糖及糖蛋白，离心后收集上清液，旋转蒸发浓缩，得到富硒茶蛋白浓缩液；(3)富硒茶蛋白浓缩液纯化：调节富硒茶蛋白浓缩液pH，用DEAE Sepharose FF对富硒茶蛋白浓缩液进行纯化，纯化过程的洗脱液采用NaCl含量为0～0.8M的Tris‑HCl缓冲液；(4)蛋白、多糖含量测定：对收集的洗脱液，用紫外分光光度法在280nm测定蛋白吸收值，用硫酸‑苯酚法在490nm处测定多糖吸收值；(5)透析、冷冻干燥：收集A280大于0.1的洗脱液，用半透膜进行透析，冷冻干燥，制得去除茶多糖、糖蛋白的富硒蛋白质精品。