[发明专利]一种改造小麦的方法有效
| 申请号： | 201710034497.2 | 申请日： | 2017-01-18 |
| 公开（公告）号： | CN107022564B | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 高彩霞;宗媛 | 申请（专利权）人： | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/113;A01H5/00;A01H6/46 |
| 代理公司： | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 关畅;陈晓庆 |
| 地址： | 100101 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了改造小麦的方法。该改造小麦的方法，包括如下步骤：抑制小麦中DEP1蛋白的表达和/或活性，进而实现小麦改造。本发明通过试验证明，利用基因组定点编辑技术同时突变小麦中DEP1基因的三个位点(即同时敲除TaDEP1‑A1基因、TaDEP1‑B1基因和TaDEP1‑D1基因)，得到了株型变矮小且光合作用增强的小麦。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 改造 小麦 方法 | ||
【主权项】：
1.一种改造小麦的方法，包括如下步骤：抑制小麦中DEP1蛋白的表达和/或活性，进而实现小麦改造；所述抑制DEP1蛋白表达的方法为使DEP1蛋白的编码基因功能降低或丧失；所述使DEP1蛋白的编码基因功能降低或丧失的方法为基因组定点编辑；所述基因组定点编辑为CRISPR/Cas9 方法；所述CRISPR/Cas9方法中，靶标序列为SEQ ID No.1；所述CRISPR/Cas9方法中使用的gRNA的序列为SEQ ID No.2；所述CRISPR/Cas9 方法中使用了如下（1）或（2）所示载体：/n（1）能转录向导RNA的重组载体，按照如下方法制备：将SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示片段进行退火，然后与经BbsI酶切的pTaU6-gRNA载体骨架相连，得到重组载体，记作pTaU6-gRNA-TaDEP1-1；/n（2）能转录向导RNA和表达Cas9蛋白的重组载体，按照如下方法制备：以载体pTaU6-gRNA-TaDEP1-1为模板，用SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示引物对进行扩增，得到扩增产物；将扩增产物用SpeI进行酶切，酶切产物与经SpeI酶切的pJIT163-Ubi-rCas9载体骨架相连，得到重组载体；/n所述改造小麦为增强小麦的光合作用能力、和/或增加小麦叶片叶绿素含量和/或改变小麦株型。/n
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