[发明专利]原位重组产生的核酸酸链有效
| 申请号： | 201680083261.1 | 申请日： | 2016-12-30 |
| 公开（公告）号： | CN109153999B | 公开（公告）日： | 2022-06-24 |
| 发明（设计）人： | J.克卢贝 | 申请（专利权）人： | 斯尼普技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N9/22;C12N15/90 |
| 代理公司： | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 梁谋;万雪松 |
| 地址： | 英国*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | 本发明涉及通过与已切割的载体的同源重组来回收或修饰靶核酸，诸如宿主细胞染色体DNA，以原位提供重组发生的核酸链。 | ||
| 搜索关键词： | 原位 重组 产生 核酸 | ||
【主权项】：
1.从供体核酸链回收核酸序列的方法，所述方法包括(a) 提供包含第一核酸链的核酸载体，其中所述第一链包含：‑i. 用于链之间的同源重组的第一同源臂(HA1)，其与所述供体链的第一核苷酸序列(NS1)同源；ii. 用于链之间的同源重组的第二同源臂(HA2)，其与所述供体链的第二核苷酸序列(NS2)同源；和iii. 将HA1的3’末端连接至HA2的5’末端的间插核苷酸序列；其中HA1在所述第一链中的HA2的5’侧；且NS1在所述供体链中的NS2的3’侧，其中所述供体链包含NS1和NS2之间的回收序列(RS)；(b) 将所述第一链与所述供体链组合；(c) 核酸酶切割HA1的5’末端或侧接所述末端的5’的第一链的第一切割位点(CS1)；和/或核酸酶切割HA2的3’末端或侧接所述末端的3’的第一链的第二切割位点(CS2)；其中步骤(b)和(c)以任何顺序或同时进行；(d) 进行切割的第一链与所述供体链的同源重组，由此所述第一链的缺口修复产生其中在HA1和HA2之间回收RS的载体；(e) 任选地分离或测序所述载体或其RS序列；其中步骤(b)至(d)在宿主细胞中进行。
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