[发明专利]葡糖淀粉酶变体和编码它们的多核苷酸

摘要

本发明涉及葡糖淀粉酶变体，所述变体具有增加的比活性和/或通过TSA测量的至少0.5摄氏度增加的解链温度，并且进一步地其中所述变体与SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少85％、至少90％、至少95％一致性、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％、但小于100％的序列一致性。本发明还涉及编码所述变体的多核苷酸；包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞；以及使用所述变体的方法。

主权项

1.一种葡糖淀粉酶变体，所述变体包含在选自下组的一个或多个位置处的取代，该组由以下组成：Q1、S2、V3、D4、S5、S8、S9、I13、K15、V18、L19、N25、S27、K28、S30、V36、V37、T43、D45、S57、V59、F60、I71、S73、T74、L77、D82、D83、V85、T86、E88、L91、S95、P97、T103、D114、S134、L137、T139、N142、L145、S146、N147、N149、Y152、V153、T154、S155、N156、L157、W158、P159、I160、Q162、V169、S170、S175、T176、Y177、D184、S186、R199、A202、A203、T206、Q210、T211、S212、Q213、V214、S215、Y217、T218、T219、Q220、A221、D222、N223、L224、F227、Y231、P234、S235、Y238、T240、T243、G244、G245、G246、R247、S248、A252、T254、L255、Y262、S265、G267、A270、A271、K279、S282、L284、V294、Y295、S296、I297、N298、S299、G300、A302、S303、N304、T309、E314、S316、Q318、G319、T326、V330、N339、E342、S343、E348、S351、T352、Q359、S362、G363、V364、T365、A366、S371、S372、T378、S381、I383、N385、F386、A392、N394、K396、Y408、K410、D412、S414、S417、V419、A426、S427、E433、A434、N436、N437、T438、Q439、G442、A446、L448、V450、N470、E472、V474、W475、N478、S484、V485、D486、A487、S492、A493、D494、N495、S501、A502、T506、I509、T510、N512、S516、A518、I519、N527、N528、A530、E534、D536、P537、N538、N539、I541、A545、S546、G547、S548、N552和T554，其中所述位置对应于在SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列中的氨基酸位置；并且其中所述在一个或多个位置处的取代提供了具有通过TSA测量的至少0.5摄氏度解链温度的增加的葡糖淀粉酶变体，并且进一步地其中所述变体与具有SEQ ID NO:3的氨基酸序列具有至少85％、至少90％、至少95％一致性、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％、但小于100％的序列一致性。