[发明专利]用于选择具有增强活性的酶的方法

摘要

在此提供的是用于增强酶活性的方法和手段。该系统利用用于将合成化合物的文库进行体外区室化的乳剂，这些合成化合物具有都直接与固相连接的基因和标记的酶底物两者。具有较大活性的表达的酶将优选从该固相中释放选择性标记，然而具有较小活性的酶将使这些标记保持完整。这些标记的化合物的去除提供了编码更具有活性的变体的富集的基因文库。还描述的是可以用于这些方法中的合成化合物和乳剂。

主权项

一种选择具有酶活性的多肽的方法，该方法包括：(i)将复数个合成化合物悬浮在水相中，其中这些合成化合物各自包括：(a)编码多肽的多核苷酸；(b)与所述多核苷酸连接的固相；(c)与所述固相连接的酶底物；以及(d)连接到所述底物的选择性标记；其中该水相包括用于表达该多肽的组分；(ii)与该水相形成油包水乳剂，其中这些合成化合物在该乳剂的水性液滴中被区室化；(iii)在该乳剂的水性液滴内表达这些多肽，其中在水性液滴中具有针对该底物的酶活性的多肽在该液滴中释放一个或多个选择性标记；并且(iv)分离这些合成化合物以回收包含该选择性标记的合成化合物和/或其中该选择性标记已经被释放的合成化合物。