[发明专利]通过LC‑MS/MS快速检测微生物对内酰胺抗生素的抗性

摘要

本发明提供一种快速筛选方法，其用于通过利用LC‑MS/MS以定量母体药物的浓度且还检测由β‑内酰胺酶活动引起的水解产物来鉴定细菌对抗生素的抗性。药敏试验在短达90分钟的时间段内完成，所述药敏试验包含培养细菌与抗生素及LC‑MS/MS分析。所述抗生素可被复用以与细菌一起进行培养来最小化分析时间。大肠杆菌的23种不同菌株已经通过此方法进行评估，所述菌株包含ATCC参考菌株(3)以及临床分离株(20)且实现了与传统方法完全一致。迄今为止，已经试验了以下抗生素青霉素、氨苄青霉素、阿莫西林、氯唑西林、哌拉西林/他唑巴坦及头孢噻肟。在不存在及存在用作对照的他唑巴坦的情况下进行所有培养。在AB SCIEX 3200 QTRAP系统上利用使用MRM检测的正离子电喷雾来进行LC‑MS/MS分析。

主权项

一种用于检测细菌微生物对一或多种抗生素药物的抗性的系统，其包括：培养装置，其经配置以在第一时间段内培养细菌微生物与一或多种抗生素药物的样品混合物，其中所述样品混合物中的所述一或多种抗生素药物的初始浓度是已知的；分离装置，其经配置以在所述第一时间段之后的第二时间段内将所述一或多种抗生素药物与所述经培养混合物分离；离子源装置，其经配置以在所述第二时间段内将所述经分离的一或多种抗生素药物反复地变换为离子；串联质谱仪，其经配置以在所述第二时间段内反复地选择及分裂所述一或多种抗生素药物的所述离子，从而在所述第二时间段内产生所述一或多种抗生素药物的多个产物离子光谱；及处理器，其与所述串联质谱仪通信，所述处理器经配置以从所述多个产物离子光谱计算所述一或多种抗生素药物的产物离子的色谱图，从所述色谱图计算所述一或多种抗生素药物的经测量浓度，比较所述经测量浓度与所述初始浓度，及在所述一或多种抗生素药物中的抗生素药物的经测量浓度比所述抗生素药物的初始浓度小预定量的情况下报告所述细菌微生物对所述抗生素药物的所述抗性的所述检测。