[发明专利]水稻耐镉性能的检测方法及耐镉水稻的选育方法有效
申请号: | 201611269901.6 | 申请日: | 2016-12-29 |
公开(公告)号: | CN106520907B | 公开(公告)日: | 2020-02-04 |
发明(设计)人: | 黄永春;刘仲齐;张长波;刘红梅 | 申请(专利权)人: | 农业部环境保护科研监测所 |
主分类号: | C12Q1/06 | 分类号: | C12Q1/06 |
代理公司: | 11371 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 吴开磊 |
地址: | 300000*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种水稻耐镉性能的检测方法及耐镉水稻的选育方法,属于水稻选育领域。水稻耐镉性能的检测方法,其包括:制备含水稻原生质体的原生质体溶液;测定原生质体溶液中的原生质体总数;将原生质体溶液与含镉离子的溶液作用后,得到含镉离子的原生质体溶液,测定含镉离子的原生质体溶液中的活性原生质体数;以及计算活性原生质体数占原生质体总数的百分比用以判断水稻的耐镉性能。本发明能够对水稻的耐镉性能进行快速、准确地检测,并且不受田间水分、气候、病害、虫害等因素的影响。 | ||
搜索关键词: | 水稻 性能 检测 方法 选育 | ||
【主权项】:
1.一种水稻耐镉性能的检测方法,其特征在于,其包括:/n制备含水稻原生质体的原生质体溶液;/n通过采用细胞荧光染料测定所述原生质体溶液中的原生质体总数;/n将所述原生质体溶液与含镉离子的溶液作用后,得到含镉离子的原生质体溶液,通过采用细胞荧光染料测定所述含镉离子的原生质体溶液中的活性原生质体数;以及/n计算所述活性原生质体数占所述原生质体总数的百分比用以判断水稻的耐镉性能;/n其中,所述细胞荧光染料为浓度为0.01wt%的二乙酸荧光素(FDA);/n其中,所述原生质体溶液为原生质体悬浮液,制备所述原生质体悬浮液的步骤包括:/n取水稻苗幼茎为原料,将水稻苗幼茎置于TVL溶液中静置,向所述TVL溶液中加入混合酶液进行酶解反应,对酶解后的溶液进行过滤处理,以及向得到的滤液中加入W5溶液并对溶液进行冷藏处理,得到所述原生质体悬浮液;所述TVL溶液包括浓度为0.25mol/L的山梨醇和浓度为40mmol/L的二水氯化钙;所述混合酶液包括重量百分含量为2%的纤维素酶和重量百分含量为0.5%的果胶酶;所述W5溶液包括浓度为150mmol/L的NaCl、浓度为128mmol/L的二水氯化钙、浓度为6mmol/L的KCl和浓度为1.5mmol/L pH=5.7的MES。/n
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