[发明专利]一种香椿叶片直接再生植株的方法

摘要

本发明公开了一种香椿叶片直接再生植株的方法，包括以下步骤：取材，外植体的预处理，外植体的表面消毒，不定芽的诱导，不定芽的增殖，不定芽的伸长，不定芽的生根。本发明的优点在于：(1)取材方便、材料丰富；(2)再生效率高，不定芽诱导率高达88.6％，生根率高达94.7％；(3)再生速度快，繁殖系数高，且能实现对获得的无菌苗叶片的进一步扩大繁殖，为优良香椿株系的快速繁殖和品种改良提供重要的技术支持；因此，本发明所提供的一种香椿叶片直接再生植株的方法，不仅为香椿优良株系的快速繁殖和规模化生产提供了技术支撑，同时也为后期香椿的品种改良奠定了基础。

主权项

1.一种香椿叶片直接再生植株的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)取材选取田间多年生香椿优良株系的叶片作为外植体；(2)外植体的预处理将步骤(1)中的香椿叶片于0.4‑0.6％的高锰酸钾溶液中浸泡2‑5min，用流水冲洗10‑20min，再于无菌操作台中用无菌水冲洗2‑3遍；(3)外植体的表面消毒对完成预处理的香椿叶片进行表面消毒；(4)不定芽的诱导将步骤(3)中完成表面消毒的香椿叶片切成切块，接种于不定芽诱导培养基中进行不定芽的诱导培养；其中，不定芽诱导培养基为添加有0.5‑5.0mg/L ZT、0.01‑0.05mg/L TDZ、2.0‑10.0mg/L AgNO3、20‑30g/L蔗糖和6.5‑7.5g/L琼脂的DKW培养基；(5)不定芽的增殖待香椿叶片切块诱导出不定芽丛后，将长有不定芽丛的叶片切块转接于不定芽增殖培养基中进行不定芽的增殖培养；其中，不定芽增殖培养基为添加有1.0‑3.0mg/L ZT、1.0‑5.0mg/L AgNO3、20‑30g/L蔗糖和6.5‑7.5g/L琼脂的DKW培养基；(6)不定芽的伸长将步骤(5)中增殖后的不定芽丛转接于不定芽伸长培养基中进行不定芽的伸长培养；其中，不定芽伸长培养基为添加有0.2‑1.0mg/L ZT、0.05‑0.2mg/L IBA、20‑30g/L蔗糖和6.5‑7.5g/L琼脂的DKW培养基；(7)不定芽的生根待不定芽伸长至一定条件后转入生根培养基进行生根培养，最终获得香椿试管苗；其中，生根培养基为添加有0.05‑0.5mg/L亚精胺、10‑20g/L蔗糖和6.5‑7.5g/L琼脂的1/2DKW培养基。