[发明专利]一种用于玉米、小麦等粮食的脱毒方法

摘要

本发明公开了一种用于玉米、小麦的脱毒方法，将玉米、小麦在30℃下热处理6d后，逐步升温至35℃，在湿度40%～68%、光照度2000～3000Lx条件下热处理30d后，将长出的新茎茎尖再行组培，即可获得100%的脱毒苗，外植体选择选择无病虫、品种纯正的健壮植株，栽于盆中，置人工气候箱内40℃处理16h、35℃处理8h、变温处理4周，在新生嫩枝上，切取带生长点的茎段3‑4cm为外植体，用流水冲洗干净。本发明用于玉米、小麦的脱毒方法能够在短期内加速繁殖玉米、小麦优良品种以供商品化生产。

主权项

一种用于玉米、小麦的脱毒方法，其特征在于，将玉米、小麦在30℃下热处理6d后，逐步升温至35℃，在湿度40%～68%、光照度2000～3000Lx条件下热处理30d后，将长出的新茎茎尖再行组培，即可获得100%的脱毒苗，1）外植体选择：选择无病虫、品种纯正的健壮植株，栽于盆中，置人工气候箱内40℃处理16h、35℃处理8h、变温处理4周，在新生嫩枝上，切取带生长点的茎段3‑4cm为外植体，用流水冲洗干净；2）茎尖剥离：将表面清洗过的外植体置于超净工作台上，用70%酒精表面消毒30s，再用0.1%升汞消毒5‑10min并不断搅动，然后用无菌水冲洗3‑5次，去鳞片，在解剖镜下用针挑取带1～2个叶原基的茎尖0.2‑0.3mm，立即接种于茎尖分化培养基中，茎尖分化培养基组成为MS+6‑BA0.5mg/L+IAA0.05mg/L+蔗糖3%；3）诱导生根：选高2‑3cm的小苗转入生根培养基，经过20‑30d的生根培养，形成完整植株的组培苗，生根培养基的组成为MS+BA1.0mg/L+蔗糖3%；4）炼苗：将生根后的试管苗移栽到经过消毒的苗床或装有消毒基质的穴盘，置于由孔径0.42mm的网纱覆盖的网室中，在温度l5‑25℃、相对湿度85%‑90%的条件下进行炼苗，初期适当遮阳，后期逐渐通风和增加光照，2‑3周后移栽苗成活；5）病毒检测：用指示植物检测法进行草毒斑驳病毒、草毒皱缩病毒、草毒镶脉病毒和玉米、小麦轻黄边病毒的检测，未检测出病毒的样本，即为用于原种苗的繁殖的原原种苗；6）原种苗的繁殖：将脱毒原原种苗定植于无土壤线虫、无玉米、小麦病源和防虫隔离区内，分株繁殖的第1代植株即为用于生产用苗的繁殖放入脱毒原种苗。