[发明专利]一种小黄鱼家系构建及优良家系选育方法

摘要

一种小黄鱼家系构建及优良家系选育方法，属于水产养殖领域中的鱼类良种选育方法。其包括以下步骤：1）小黄鱼亲鱼获得；2）小黄鱼家系构建；3）家系标准化培育；4）小黄鱼家系荧光标记；5）快速生长家系的筛选。采用上述方法，可以通过构建小黄鱼家系，采用标准化方法进行苗种培育，培育后期对家系进行荧光标记并进行混合养殖，两种方法可有效排除不同养殖环境对家系生长的影响，家系标记时测定体质量作为协变量带入到家系筛选分析模型中，更进一步排除环境因素的影响，可以准确高效的筛选出生长快速的家系。

主权项

1.一种小黄鱼家系构建及优良家系选育方法，其特征在于包括以下步骤：1）小黄鱼亲鱼获得；2）小黄鱼家系构建；3）家系标准化培育；4）小黄鱼家系荧光标记；5）快速生长家系的筛选；所述步骤1）小黄鱼亲鱼获得具体包括：取野生小黄鱼繁殖的F1个体和野生小黄鱼作为亲鱼，分别进行强化培育，其中饵料为活沙蚕，拌以3%的维生素C；次年自然水温达到15℃时，观察亲鱼性腺发育情况，挑选出性腺发育良好的亲鱼，准备用于构建家系；所述步骤2）小黄鱼家系构建具体包括：a家系构建：从步骤1）中的亲鱼中挑选出性腺发育至V期的F1养殖小黄鱼雌鱼10尾，野生小黄鱼雄鱼5尾，进行人工催产，雌鱼注射催产剂量：LRH‑A₂ 0.25µ g + HCG 100IU/kg鱼体重，雄鱼注射剂量减半，注射催产剂后的F1养殖小黄鱼雌鱼放入亲鱼培育桶中，野生小黄鱼雄鱼放于另一个亲鱼培育桶中，流水刺激促使精卵发育成熟，亲鱼培育桶上覆盖黑色遮光网，催产后36h后每隔2h检查一次，及时捞出发育成熟的雌鱼，采用人工挤卵的方式获得卵子，每尾雌鱼的卵子独立采集分别放置于塑料烧杯中，同时用塑料吸管采集野生小黄鱼雄鱼精液，采用一雄配2雌的方式进行人工干法受精，受精完成后将静置5min，分别收集上浮的优质受精卵倒入筛绢缝制洗卵的手抄网中，放入添加了聚维酮碘的16±0.5℃海水中进行轻柔冲洗杀菌消毒，随后用海水清洗3遍，把洗好的各个家系受精卵分别放入单独的孵化桶中孵化；b苗种孵化管理：每桶孵化桶布卵量为20mL，孵化桶水温16±0.5℃，盐度26‑28，DO≥5mg/L, pH 7.8‑8.5，光照300‑500Lux，每天早、晚两次采用虹吸法吸出沉于底部的未孵化受精卵，受精卵经40h孵化发育至膜内仔鱼期时将受精卵转移到苗种培育桶中进行培育；所述步骤3）家系标准化培育具体包括：每个培育桶中投放受精卵15mL，培育桶中初始水体0.5m³，仔鱼出膜第3d开始每天加水0.1m³，第7日龄时开始换水，每天上午和下午各换水一次，初始换水量为10%，每隔3天增加10%的换水量，逐渐增加到100 %；1‑15日龄微充气，以充气最高水流超出水面1cm，15日龄时，仔鱼停止投喂轮虫后改为常流水，流水速率为60L/h，充气量增大，以充气水流高出水面3cm；仔鱼孵出后第3d投喂开口饵料褶皱臂尾轮虫，投喂量8‑10个/mL，同时在培育桶中投放浓缩小球藻用于调节水色和饲喂轮虫，12日龄开始增加投喂卤虫无节幼体，卤虫数量1‑2个/mL，投喂前停止流水，并且培育桶中排水30%，投喂卤虫半小时之后再投喂轮虫，轮虫投喂量降低为5‑6个/mL，日投喂2次，轮虫投喂后半小时开始缓慢加水，卤虫数量每2天增加1个/mL，轮虫数量相应减少，15日龄停止投喂轮虫，开始进行人工配合饲料的驯化，先投喂鱼宝饲料2#，半小时之后再投喂卤虫；随着苗种长大，卤虫密度逐渐降低，每3天降低1个/mL，直至降到1个/mL，保持这一投喂量，人工配合饲料投喂量逐渐增加，20日龄时，对各个家系苗种数量进行标准化，每个培育桶苗种数量均严格保持在1200‑1400尾，30日龄之后彻底停喂卤虫，全部投喂人工配合饲料，根据苗种生长情况更换颗粒直径较大的饲料进行投喂，苗种达到40日龄时，每桶保留一半苗种，则每桶苗种数量为600‑700尾，苗种达到60日龄时，每桶苗种数量再次减半，此时苗种数量300‑350尾；所述步骤4）小黄鱼家系荧光标记具体包括：家系生长至90日龄时，每个家系随机取样200尾，采用荧光染料进行标记，家系标记之前，用0.2ppm丁香酚对待标记个体进行麻醉1min，然后进行荧光标记，标记完成后迅速放入水泥池中，并采用盐酸土霉素进行为期3天的药浴；所述步骤5）快速生长家系的筛选具体包括：小黄鱼家系生长至60日龄和90日龄时，每个家系随机抽样30尾进行体质量测定；首先用浓度为0.2ppm丁香酚麻醉待测量个体1min，用量程为6kg的电子称称量体质量，精度0.1g，家系生长至150日龄，即在水泥池中混合养殖2个月后，每个家系再次随机取样30尾测量体质量，分别计算各个家系体质量的平均数，利用日增重率、相对增重率评价不同家系的生长性能，日增重率、相对增重率越大，其生长速度越快、生长性能越好，即可筛选出快速生长的家系。