[发明专利]一种高通量体液蛋白质样品预处理装置及其应用

摘要

本发明涉及一种高通量体液蛋白质样品预处理装置，是一种集体液(血浆，血清，尿液)高丰度蛋白质去除，中低丰度蛋白质在线变性和还原、除盐以及在线酶解的系统，包括：体液高丰度蛋白质去除抗体柱，集束式高温变性和还原器，集束式溶剂置换器以及固定化酶反应器。体液蛋白质样品首先通过抗体柱去除高丰度蛋白质，然后洗脱下来的中低丰度蛋白质再通过集束式高温变性和还原器实现在线、快速变性和还原，通过集束式溶剂置换器将变性剂和还原剂去除，最后通过固定化酶反应器在线酶解，酶解产生的肽段可以通过质谱进行检测。本发明的优点是将体液蛋白质的复杂样品预处理过程进行了集成化。

主权项

1.一种高通量体液蛋白质样品预处理装置，包括：依次串连体液高丰度蛋白质去除系统(A)和集束式蛋白质样品预处理装置(B)；其特征在于：集束式蛋白质样品预处理装置(B)包括依次串连的集束式高温变性和还原器、集束式溶剂置换器和酶反应器；所述集束式高温变性和还原器包括2根以上管状中空纤维膜和变性和还原反应腔体；将2根以上根中空纤维膜集束在聚四氟管中，聚四氟管二端用环氧胶固定于变性和还原反应腔体内，以集束式中空纤维膜为蛋白质传输载体，集束式中空纤维膜两端穿过变性和还原反应腔体侧壁面伸出腔体外，并于变性和还原反应腔体上设有物料进口和出口；变性和还原反应腔体外壁面上设有电加热膜；所述集束式溶剂置换器包括2根以上管状中空纤维膜和缓冲液置换腔体；将2根以上根中空纤维膜集束在聚四氟管中，聚四氟管二端用环氧胶固定于变性和还原反应腔体内，以集束式中空纤维膜为蛋白质传输载体，中空纤维膜固定于缓冲液置换腔体中，集束式中空纤维膜两端穿过缓冲液置换腔体侧壁面伸出腔体外，并于缓冲液置换腔体上设有物料进口和出口；集束式高温变性和还原器中的集束式中空纤维膜入口端相连体液高丰度蛋白质去除系统(A)包括色谱柱，色谱柱一端经液相色谱泵与体液蛋白质样品储罐相连，色谱柱另一端与集束式高温变性和还原器中的集束式中空纤维膜入口端相连；所述高通量体液蛋白质样品预处理装置是将体液高丰度蛋白质去除色谱柱的入口端与体液蛋白质样品储罐相连，从色谱柱上洗脱下来的中低丰度蛋白质直接进入集束式高温变性和还原器，高温变性和还原器上的中空纤维膜的物料流出端与溶剂置换器上的中空纤维膜的物料流入端相连通；溶剂置换器上的中空纤维膜的物料流出端与酶反应器的物料入口相连；产物由酶反应器的物料出口流出，中低丰度蛋白质通过酶反应器被迅速切割成多肽，实现中低丰度蛋白质到多肽的快速转化；集束式高温变性和还原器中的物料进口与变性还原反应液相连、出口为废液出口；缓冲液置换腔体上设有物料进口与溶剂置换液相连、出口为废液出口。