[发明专利]一种rs12979860基因分型双色荧光PCR快速检测试剂盒在审
| 申请号: | 201611039569.4 | 申请日: | 2016-11-21 |
| 公开(公告)号: | CN106399565A | 公开(公告)日: | 2017-02-15 |
| 发明(设计)人: | 赵友云;孙莉军;郑毅;王业富 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司44102 | 代理人: | 倪娅,陈卫 |
| 地址: | 430072*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种rs12979860位点基因分型双色荧光PCR快速检测试剂盒,本发明通过重新设计了引物和TaqMan‑MGB探针,优化反应体系,双组分热启动DNA聚合酶构成酶活自动调节系统、ROX Reference Dye可消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差,从而实现准确、扩增效率高,灵敏度高、特异性好、重复性好、操作简便且检测用时更短,使该技术能够实现临床上的应用与推广。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 rs12979860 基因 分型双色 荧光 pcr 快速 检测 试剂盒 | ||
【主权项】:
一种rs12979860位点基因分型双色荧光PCR快速检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括DNA提取液和双色荧光PCR反应液;所述双色荧光PCR反应液包含以下组分:(1)基于rs12979860位点的引物探针组正向引物F,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;反向引物R,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;C荧光探针S1,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;T荧光探针S2,其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示;(2)PCR反应体系PCR 10×buffer、25mM的MgCl2、dNTPs含dUTP、双组分热启动DNA聚合酶、50×ROX Reference Dye、RNase‑Free ddH2O;所述PCR 10×buffer内含100mM pH8.8的Tris‑HCl、500mM的KCl、0.8%v/v的Nonidet;所述PCR 10×buffer不含有Mg2+;所述双组分热启动DNA聚合酶为化学修饰的HotStar Taq DNA聚合酶和抗体修饰的Anti Taq DNA聚合酶。
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