[发明专利]用于胭脂萝卜组织培养的MS培养基、丛生芽培养基及胭脂萝卜的组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明提供用于胭脂萝卜组织培养的MS培养基、丛生芽培养基及胭脂萝卜的组织培养快速繁殖方法，MS培养基的组分包括NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H2BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·5H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、Na2‑EDTA·2H2O、肌醇、烟酸、甘氨酸、盐酸吡哆醇和盐酸硫胺素。丛生芽培养基在MS培养基的基础上组分还包括6‑BA、NAA、2,4‑D、TDZ、KT、蔗糖和琼脂。所述方法步骤包括无菌外植体的获取、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养及炼苗移栽。

主权项

1.一种胭脂萝卜的组织培养快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：先将预处理并灭菌后的胭脂萝卜种子接种于无菌苗培养基上诱导培养获得无菌苗，取无菌苗的茎尖接种于丛生芽诱导培养基上进行初代培养诱导产生丛生芽，将丛生芽接种于继代增殖培养基上进行继代培养获得增殖苗，将增殖苗分离成单苗后转接于壮苗培养基上壮苗培养得到健壮苗，将健壮苗转移到生根培养基上培养获得生根幼苗，对生根幼苗进行炼苗处理后，将幼苗移栽到土壤中进行繁殖，获得胭脂萝卜；所述无菌苗培养基由1/2MS培养基和6~8 g/L琼脂组成，pH值调至5.8~6.2；所述丛生芽诱导培养基由MS培养基、2~6 mg/L 6‑BA、0.05~0.2 mg/L NAA、0.05~0.2 mg/L 2,4‑D、0.5~3 mg/L TDZ、0.05~0.2 mg/L KT、20~30 g/L 蔗糖和6~8 g/L 琼脂组成，培养基pH值为5.8~6.2；所述继代增殖培养基由MS培养基、2~4 mg/L 6‑BA、0.2~10 mg/L NAA、0.05~0.2 mg/L 2,4‑D、0.2 mg/L TDZ、0.05 mg/L KT、20~30 g/L 蔗糖和6~8 g/L 琼脂组成，培养基pH值为5.8~6.2；所述壮苗培养基由MS培养基、0.5~1.5 g/L AC、2~6 mg/L 6‑BA 、0.1~0.2 mg/L NAA、0.05~0.1 mg/L 2,4‑D、0.5~3 mg/L TDZ、0.05~0.2 mg/L KT、20~30g/L蔗糖和6~8g/L琼脂组成，培养基pH值为5.8~6.2；所述生根培养基由MS培养基、0.5~1.5 g/L活性炭、0.1~0.5 mg/L NAA、6~8 g/L琼脂和20~30 g/L蔗糖组成；所述MS培养基的溶剂为水，溶质的组分包括MS无机物和MS有机添加物；每升所述MS培养基中MS无机物由NH4NO3 1320~1980mg、KNO3 1520~2280mg、CaCl2·2H2O 352~528mg、MgSO4·7H2O 298~442mg、KH2PO4 136~204mg、KI 0.664~0.996mg、H2BO3 4.96 ~6.4mg、MnSO4·4H2O 17.84~26.76mg、ZnSO4·7H2O 6.88 ~10.32mg、Na2MoO4·5H2O 0.20~0.30mg、CuSO4·5H2O 0.020~0.030mg、CoCl2·6H2O 0.025~0.030mg、FeSO4·7H2O 22.24~33.40mg和Na2‑EDTA·2H2O 29.84~44.76mg组成；每升所述MS培养基中MS有机添加物由肌醇80~120mg、烟酸0.4~0.6mg、甘氨酸1.6~2.4mg、盐酸吡哆醇0.4~0.6mg和盐酸硫胺素0.08~0.12mg组成。