[发明专利]一种载血管内皮生长因子和万古霉素的十微米级多层核壳型缓释微球制剂及其制备方法

摘要

一种载血管内皮生长因子和万古霉素的十微米级多层核壳型缓释微球制剂及其制备方法，属于药物缓释微球技术领域。本发明以乳化交联法制备的海藻酸钙为核心球，外层利用层层自组装原理依次包覆壳聚糖、海藻酸钠和壳聚糖形成粒径为十微米级的多层核壳型载药微球，其中核心的海藻酸钙负载血管内皮生长因子(VEGF)，外层的壳聚糖负载万古霉素，兼具促进血管生成和抗感染两种潜能。本发明所述微球呈圆球状，分散性好，粒径分布范围较窄，为30～80μm，平均约56μm，适用于骨修复支架材料；VEGF和万古霉素包封率分别可达49.63％和14.55％，体外累积释放时间分别可达16.5d和12.5d，累积释放率可达80％以上。

主权项

一种载血管内皮生长因子和万古霉素的十微米级多层核壳型缓释微球制剂的制备方法，其步骤如下：(1)利用乳化法制备负载血管内皮生长因子的海藻酸钙核心球：将血管内皮生长因子溶于海藻酸钠水溶液中，血管内皮生长因子的浓度范围为0.01～0.1μg/mL；海藻酸钠水溶液中，海藻酸钠纯品的黏度为20mPa·s，海藻酸钠的浓度范围为0.01～0.015g/mL；将司盘80溶于异辛烷中，司盘80的浓度范围为0.02～0.04g/mL；800～1200r/min搅拌下，将20mL溶有血管内皮生长因子的海藻酸钠水溶液缓慢加入到司盘80的异辛烷溶液中，司盘80的异辛烷溶液与海藻酸钠水溶液的体积比范围为3～1：1；10～20min后滴加2mL吐温80的水溶液，司盘80与吐温80的质量比为5.3：1，使得溶液的HLB值达6；继续乳化5～10min后，滴加20mL、浓度范围为0.06～0.08g/mL的CaCl2水溶液，搅拌固化10～20min后交联形成海藻酸钙微球溶液，离心并用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤离心产物，得到负载血管内皮生长因子的海藻酸钙核心球，粒径为5～25μm；(2)将50mg万古霉素溶于30mL、浓度为0.01～0.02g/mL的壳聚糖溶液，该壳聚糖溶液是将壳聚糖溶于体积分数为2％的醋酸溶液中制得，在搅拌条件下，加入步骤(1)制备得到的全部海藻酸钙核心球，300～500r/min转速下搅拌10～20min，4000～6000r/min转速下离心并用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得到海藻酸钙‑壳聚糖微球；(3)将0.15g海藻酸钠溶于30mL蒸馏水，海藻酸钠纯品黏度为5mPa·s，将步骤(2)得到的全部海藻酸钙‑壳聚糖微球加入到该海藻酸钠溶液中，300～500r/min搅拌10～20min，4000～6000r/min转速下离心并用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得到海藻酸钙‑壳聚糖‑海藻酸钠微球；(4)将50mg万古霉素溶于30mL、浓度为0.01～0.02g/mL的壳聚糖溶液，该壳聚糖溶液是将壳聚糖溶于体积分数为2％的醋酸溶液中制得，在搅拌条件下，将步骤(3)得到的全部海藻酸钙‑壳聚糖‑海藻酸钠微球加入，300～500r/min搅拌10～20min，4000～6000r/min离心并用无水乙醇、蒸馏水依次洗涤得到海藻酸钙‑壳聚糖‑海藻酸钠‑壳聚糖微球，真空冷冻干燥得到载血管内皮生长因子和万古霉素的十微米级多层核壳型缓释微球，粒径为30～80μm。