[发明专利]一种紫藤瘤中单体化合物的用途及其分离纯化方法

摘要

本发明公开了一种紫藤瘤中单体化合物的用途及其分离纯化方法，其中紫藤瘤中单体化合物为3′,5′‑二羟基‑2′,4′,7‑三甲氧基异黄烷、2′,4′,4‑三羟基查尔酮或12‑齐墩果烯‑3,22,24‑三醇。本发明单体化合物是从紫藤瘤中提取分离而得，可以用于抑制农作物病原性真菌。

主权项

1.一种紫藤瘤中单体化合物的分离纯化方法，其特征在于包括如下步骤：(1)取干燥的紫藤瘤药材，粉碎，以70～95vt％乙醇为溶剂在80℃下回流提取三次，每次2小时，合并提取液，回收提取溶剂，浓缩后得到相对密度为1.1的浸膏；(2)将所得浸膏用硅胶柱梯度洗脱，TLC检识，合并相同组分后得到8个组分，极性由小到大依次称为Z1‑Z8；步骤(2)中洗脱剂由二氯甲烷和甲醇构成，洗脱剂中二氯甲烷和甲醇的体积比为100:0～0:1，洗脱剂的极性由小到大进行梯度洗脱分离；(3)组分Z4经硅胶柱梯度洗脱，TLC检识，合并相同组分后得到8个组分，极性由小到大依次称为A‑H；步骤(3)中洗脱剂由石油醚和乙酸乙酯构成，洗脱剂中石油醚和乙酸乙酯的体积比为50:1～0:1，洗脱剂的极性由小到大进行梯度洗脱分离；(4)组分E先经MCI柱梯度洗脱，再经pre‑HPLC纯化得单体化合物3′,5′‑二羟基‑2′,4′,7‑三甲氧基异黄烷；步骤(4)中MCI柱梯度洗脱的洗脱剂由甲醇和水构成，洗脱剂中甲醇和水的体积比为0:1～100:0，洗脱剂的极性由小到大进行梯度洗脱分离；(5)组分H经反相Rp18中压柱色谱梯度洗脱，得到五个组分，极性由小到大依次称为H1～H5；步骤(5)中洗脱剂由甲醇和水构成，洗脱剂中甲醇和水的体积比为10:90～100:0，洗脱剂的极性由小到大进行梯度洗脱分离；(6)组分H1依次经硅胶柱洗脱、经凝胶柱分离，再经pre‑HPLC分离纯化得到单体化合物12‑齐墩果烯‑3,22,24‑三醇；硅胶柱洗脱时的洗脱剂为石油醚和丙酮按体积比8:1构成，凝胶柱分离时的洗脱剂为氯仿和甲醇按体积比1:1构成，pre‑HPLC分离纯化时的洗脱剂为乙腈和水按体积比30:70‑40:60构成；(7)组分H2经凝胶柱分离并经pre‑HPLC分离纯化得到单体化合物2′,4′,4‑三羟基查尔酮；凝胶柱分离时的洗脱剂为氯仿和甲醇按体积比1:1构成，pre‑HPLC分离纯化时的洗脱剂为乙腈和水按体积比30:70‑32:68构成。