[发明专利]新型慢病毒包装方法有效
| 申请号： | 201610977672.7 | 申请日： | 2016-11-08 |
| 公开（公告）号： | CN106497889B | 公开（公告）日： | 2019-10-11 |
| 发明（设计）人： | 史镜宇;章宏远;刘艳红;言国英;王敬红;赵林军;刘师岐 | 申请（专利权）人： | 杭州倍沃医学科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;C12N7/02 |
| 代理公司： | 北京元中知识产权代理有限责任公司 11223 | 代理人： | 王明霞 |
| 地址： | 311121 浙江省杭州市余*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种新型慢病毒包装方法，由下述步骤组成：(1)接种2×106个293T细胞；(2)转染的混合物培养12‑15小时；(3)混合每个转染离心管，病毒载体为10ug小片段RNA质粒，40ug包装质粒，20ug包膜蛋白质粒，用100mM氯化钠补足体积100μL；(4)配置Biomiga GenetranⅢ和氯化钠的混合液；(5)加80μL的Biomiga GenetranⅢ和氯化钠混合物到转染离心管中，总体积180μL；(6)室温放置20‑30分钟；(7)从细胞中吸出培养基，然后加8ml的新鲜培养基，半个小时内加50μL仲丁巴比安，混匀；(8)培养48‑60小时；(9)72小时后，收集病毒。 | ||
| 搜索关键词： | 新型 病毒 包装 方法 | ||
【主权项】：
1.一种新型慢病毒包装方法，其特征在于，由下述步骤组成：(1)10cm的组织培养板上，12ml培养基，接种2×106个293T细胞，37度，5％二氧化碳条件下培养，准备用质粒转染细胞；(2)转染的混合物培养12‑15小时；(3)在聚丙烯离心管中，加入以下质粒，然后混匀，10 μ g 小片段RNA质粒，40μ g包装质粒，20μ g包膜蛋白质粒，用100mM氯化钠补足体积100μL；(4)用氯化钠混合好Biomiga GenetranⅢ转染试剂，配置Biomiga GenetranⅢ和氯化钠的混合液；所述Biomiga GenetranⅢ和氯化钠的混合方法为，在一个聚丙烯管中，先加氯化钠，直接吸氯化钠，被稀释之前的Biomiga GenetranⅢ不接触管壁，然后轻轻旋转移动离心管，室温放5分钟；(5)加80μL的Biomiga GenetranⅢ和氯化钠混合物到转染离心管中，总体积180μL，轻轻旋转离心管；所述每个转染离心管反应包括6μL的Biomiga GenetranⅢ和74μL的氯化钠；(6)室温放置20‑30分钟；(7)从培养板中吸走培养基，然后加8ml的新鲜培养基，半个小时内加50μL仲丁巴比安，混匀；(8)37度，5％二氧化碳培养48‑60小时；(9)72小时后，收集病毒，3000转，4度离心10分钟，将上清转移到15ml的离心管中。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于杭州倍沃医学科技有限公司，未经杭州倍沃医学科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610977672.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
