[发明专利]一种柑橘韧皮部汁液制备方法

摘要

本发明公开了一种柑橘韧皮部汁液制备方法：从树体剪取枝条，密封袋标记保存并放入超低温冰箱冻存；提取汁液时剪去枝条叶片，用灭菌去离子水将枝条外部冲洗干净并将表面的水拭去，用刀片把枝条树皮纵向划开，再将树皮与木质部分剥离开，保留带有韧皮部组织的树皮部分；将树皮切成小段装入内衬分离管，再将内衬分离管置于外部支撑收集管，然后用冷冻离心机分离；离心完成后，弃掉内衬分离管，外部支撑收集管中的上清液即为柑橘韧皮部汁液。本方法采样简单易行，超低温冻融既保持样品的生物活性，便于枝条韧皮部和木质部易于分离，提高了韧皮部汁液的提取率。

主权项

1.一种柑橘韧皮部汁液制备方法，其特征在于，具体步骤如下：(1)从树体剪取枝条，每株取3‑5个枝条，密封袋标记保存；(2)迅速将步骤(1)获得的样品枝条放入超低温冰箱冻存；(3)内衬分离管的制备：准备灭菌洁净的0.6ml离心管，离心管底部需要提前用无菌大号针头戳一个直径为1mm的圆形渗漏孔，剪去管盖；(4)外部支撑收集管的制备：准备灭菌洁净的1.5ml离心管，使1.5ml离心管的管壁边缘刚好作为内衬分离管管口的支撑，并能套在内衬分离管外部；(5)从超低温冰箱中取出步骤(2)的样品枝条，用洁净剪刀去除枝条叶片，然后用灭菌去离子水将枝条外部冲洗干净，用无菌滤纸将表面的水拭去,本过程应在3‑5分钟内完成；(6)用无菌锋利的刀片把枝条树皮纵向划开，深达木质部，再将树皮与木质部分剥离开，去除木质部，保留带有韧皮部组织的树皮部分；(7)用灭菌的剪刀或刀片将树皮切成小段，以5‑10个小段为一束装入步骤(3)制备好的内衬分离管，再将内衬分离管置于步骤(4)制备好的外部支撑收集管中形成离心收集管，然后放置在冰上预冷；(8)将步骤(7)制备好的离心收集管用冷冻离心机分离；(9)离心完成后，弃掉内衬分离管，外部支撑收集管中的上清液即为柑橘韧皮部汁液；(10)用无菌移液器吸头小心吸取外部支撑收集管中的上清液，转移到另一灭菌洁净冻存离心管中，并保存备用。