[发明专利]基于化学氧化和酶催化结合技术制备熊去氧胆酸的方法有效
| 申请号: | 201610969854.X | 申请日: | 2016-10-28 |
| 公开(公告)号: | CN106520888B | 公开(公告)日: | 2020-01-07 |
| 发明(设计)人: | 张天;杨眉 | 申请(专利权)人: | 西安岳达生物科技股份有限公司 |
| 主分类号: | C12P33/00 | 分类号: | C12P33/00 |
| 代理公司: | 11782 北京科领智诚知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人: | 陈士骞 |
| 地址: | 710000 陕西省西安市西安市*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种利用NBS氧化丙酮溶解的鹅去氧胆酸生成7‑羰基‑石胆酸,结合生物酶催化将7‑羰基‑石胆酸(7k‑LCA)催化合成熊去氧胆酸(UDCA)的新思路,其特征在于包括以下步骤:该项技术利用NBS氧化丙酮溶解的鹅去氧胆酸生成7‑羰基‑石胆酸的效率高,成本低的特点,结合重组大肠杆菌的高密度发酵,产生高纯度,高活性,高稳定性的催化酶(7β‑HSDH),在水相中,选择性的催化7k‑石胆酸,生成熊去氧胆酸(UDCA),该合成工艺简单,合成路线短,转化率高,成本低,是一种新型的基于化学氧化和酶催化结合技术制备熊去氧胆酸的方法。 | ||
| 搜索关键词: | 基于 化学 氧化 催化 结合 技术 制备 熊去氧 胆酸 方法 | ||
【主权项】:
1.基于化学氧化和酶催化结合技术制备熊去氧胆酸的方法,包括以下步骤:(a)NBS在丙酮溶液中能将鹅去氧胆酸的7位羟基氧化成酮,生成7-羰基-石胆酸;(b)在步骤(a)反应后的混合物中,利用重组大肠杆菌高密度发酵产生的高纯度、高活性的催化酶7β-HSDH,结合辅酶NADPH的作用,催化中间产物7-羰基-石胆酸(7k-LCA)7位羰基成为羟基,得到转化液;(c)将步骤(b)中的转化液调至pH为酸性,使7β-HSDH变性和产物结晶,采用高速离心机离心除去蛋白和溶剂,蒸馏除去剩余溶剂,得到熊去氧胆酸粗品;将得到的熊去氧胆酸粗品和乙酸乙酯加入反应容器中,升温并回流1小时,降温至常温,过滤得到纯度大于99%熊去氧胆酸。/n
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