[发明专利]一种基于DNA功能化纳米复合材料的电化学免疫传感器

摘要

本发明公开了一种基于DNA功能化纳米复合材料的电化学免疫传感器。该电化学免疫传感器是在基体电极上负载树枝状金属后，再加入负载抗体标记物的介孔材料，接着引入DNA杂交链，最后加入活性物质后形成的。其制备包括以下步骤：1）制备基体材料；2）制备负载抗体标记物的介孔材料；3）构建电化学免疫传感器。并公开了一种基于DNA功能化纳米复合材料的电化学免疫传感器在检测毒素中的应用。本发明基于多重信号放大的策略，构建了一种高灵敏度、低检测限的电化学免疫传感器。通过利用DNA扩增技术的高扩增能力，电化学检测的高灵敏性，与纳米材料表面效应放大信号等策略相结合，建立一种快速免疫分析方法，实现了对痕量毒素的检测。

主权项

1.一种基于DNA功能化纳米复合材料的电化学免疫传感器，其特征在于：是在基体电极上负载树枝状金属后，再加入负载抗体标记物的介孔材料，接着引入DNA杂交链，最后加入活性物质后形成的；所述的基体电极是氧化铟锡电极；所述的树枝状金属为金；所述的负载抗体标记物的介孔材料吸附有活性物质亚甲基蓝；所述的介孔材料为氨基化改性的二氧化硅介孔材料；这种基于DNA功能化纳米复合材料的电化学免疫传感器的制备，包括以下步骤：1)制备基体材料氧化铟锡电极在含有HAuCl4、H2SO4、L‑半胱氨酸的溶液中，采用电沉积方法，合成树枝状Au；2)制备负载抗体标记物的介孔材料通过十六烷基三甲基溴化铵CTAB和二氧化硅纳米球乙醇溶液、正己烷和正硅酸乙酯反应，合成正己烷‑CTAB‑SiO2复合胶束，经分离后得到二氧化硅@介孔二氧化硅核壳结构纳米材料SiO2@MSN；再加入3‑氨丙基三乙氧基硅烷进行氨基化，合成得到功能化介孔材料SiO2@MSN‑NH2；在得到的SiO2@MSN‑NH2中加入亚甲基蓝MB，得到SiO2@MSN‑NH2‑MB；最后用SiO2@MSN‑NH2‑MB、二抗Ab2和DNA探针S0合成改性核壳结构纳米材料标记物SiO2@MSN‑MB‑Ab2‑S0；3)构建电化学免疫传感器树枝状Au的氧化铟锡电极上分别滴加抗原、封闭液；再加入一抗Ab1和检测物，一抗上到抗原上；再将SiO2@MSN‑MB‑Ab2‑S0加入，二抗结合到一抗上；接着把DNA探针S1和S2混合后加入，发生杂交链反应生成双链结构；然后加入血红素hemin，合成hemin/G‑四链体类DNA酶；最后加入亚甲基蓝，构成基于DNA功能化纳米复合材料的电化学免疫传感器。