[发明专利]线粒体靶向的活性氧拮抗剂延缓储存血小板凋亡的方法在审

专利信息
申请号: 201610966334.3 申请日: 2016-10-28
公开(公告)号: CN106508889A 公开(公告)日: 2017-03-22
发明(设计)人: 王志成;王力;范志佳 申请(专利权)人: 复旦大学附属华山医院
主分类号: A01N1/02 分类号: A01N1/02
代理公司: 上海智力专利商标事务所(普通合伙)31105 代理人: 吕玲玉
地址: 200040 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明公开了一种线粒体靶向的活性氧拮抗剂延缓储存血小板凋亡的方法,该方法包括以下步骤步骤1,分组将单采血小板分为3组Mito‑TEMPO组,溶剂对照组,正常对照组,在22±2°C震荡保存7天,然后利用无菌接管机分别在保存1天、3天、5天、和7天时均取5‑10ml的单采血小板,步骤2,制备洗涤血小板步骤3,检测血小板的凋亡指标将所述步骤2制得的洗涤血小板进行血小板ΔΨm去极化检测,或将所述步骤2制得的洗涤血小板进行血小板PS暴露检测。本发明中该方法能够延缓储存血小板凋亡。
搜索关键词: 线粒体 靶向 活性氧 拮抗剂 延缓 储存 血小板 方法
【主权项】:
一种线粒体靶向的活性氧拮抗剂延缓储存血小板凋亡的方法,其特征在于该方法包括以下步骤:步骤1,分组:将单采血小板分为3组:Mito‑TEMPO组,溶剂对照组,正常对照组,在22±2°C震荡保存7天,然后利用无菌接管机分别在保存1天、3天、5天、和7天时均取5‑10ml的单采血小板,步骤2,制备洗涤血小板:所述制备洗涤血小板包括以下步骤:a、离心,首先,将所述步骤1已取出的单采血小板分别进行离心处理,弃上清液,得到沉淀的血小板,b、洗涤,用第一缓冲液悬浮并离心、洗涤所述a得到的沉淀的血小板,然后重复步骤b一次,c、重悬,用第二缓冲液重悬所述b洗涤后得到的血小板,得到血小板悬液,d、计数,用计数板对血小板进行计数,得到洗涤血小板,调整洗涤血小板至浓度为3 ×108个/ml,室温静置60 min;步骤3,检测血小板的凋亡指标:将所述步骤2制得的洗涤血小板进行血小板ΔΨm去极化检测,或将所述步骤2制得的洗涤血小板进行血小板PS暴露检测。
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