[发明专利]一种基于Au@Ag@Au标记的癌胚抗原电化学免疫传感器的制备及应用

摘要

本发明涉及电化学免疫传感技术领域，特别是涉及一种基于金银金核壳纳米复合物（Au@Ag@Au NPs）标记的癌胚抗原电化学免疫传感器的制备及应用。具体是利用氮掺杂石墨烯（NG）修饰玻碳电极表面作为抗体捕获基底，Au@Ag@Au NPs跟踪标记癌胚抗原第二抗体，通过夹心免疫反应，Au@Ag@Au NPs标记的第二抗体被捕获到传感器的表面，通过检测过氧化氢和对苯二酚在PBS溶液中的电化学信号实现癌胚抗原的检测。

主权项

一种基于Au@Ag@Au标记的癌胚抗原电化学免疫传感器的制备及应用，其特征在于包括以下步骤： (1)用Al2O3抛光粉打磨直径为4 mm的玻碳电极(GCE)，分别在乙醇和超纯水中超声清洗3 min，氮气吹干；取6~10 μL氮掺杂石墨烯/癌胚抗原第一抗体的复合物（NG‑Ab1）分散液滴涂到电极表面，在4 ℃冰箱中孵育12 h，用PBS(pH 7.4)缓冲溶液冲洗，得到Ab1‑NG/GCE； (2)取10 μL 质量分数为1~3%的牛血清白蛋白(BSA)溶液滴涂到电极表面，在37℃下孵化1 h，封闭非特异性结合的位点，用PBS (pH 7.4)缓冲溶液冲洗电极表面得到BSA/Ab1‑NG/GCE；(3)滴加10 μL浓度为0.01~10 ng/mL的一系列不同浓度的癌胚抗原标准溶液用于与抗体特异性识别，在37 ℃下孵育60 min，用PBS(pH 7.4)缓冲溶液冲洗电极表面，得CEA/BSA/Ab1‑NG/GCE； (5)滴加6~10 μL Au@Ag@Au标记CEA第二抗体(Ab2‑Au@Ag@Au)到上述电极表面，在37 ℃下孵育60 min，用PBS(pH 7.4)缓冲溶液冲洗电极表面，制得一种Au@Ag@Au标记的癌胚抗原电化学免疫传感器 (Ab2‑Au@Ag@Au/CEA/BSA/Ab1‑NG/GCE)。