[发明专利]一种获取安普霉素高产菌株的高通量筛选方法

摘要

本发明涉及一种获取安普霉素高产菌株的高通量筛选方法，步骤如下(1)取黑暗链霉菌孢子至无菌水中，混合均匀，制得活跃链霉菌孢子悬液；(2)将黑暗链霉菌孢子悬液转接至灭菌后的培养皿中，无菌风吹干，制得菌膜，然后进行低能离子束的注射诱变，再进行紫外照射，使用无菌水洗涤后涂布平板培养基，制得单菌落；(3)将单菌落，接入孔板内的孔板培养基中，震荡培养，制得培养液；(4)将培养液，转接至含枯草芽孢杆菌的生测培养基平板中进行抑菌检测，选取抑菌圈直径大于15mm的单菌进行复筛。本发明所述获取安普霉素高产菌株的高通量筛选方法采用低能离子束紫外照射复合诱变，同时结合先进的高通量筛选技术效率高、筛选效果好、可重复性高。

主权项

一种获取安普霉素高产菌株的高通量筛选方法，其特征在于，步骤如下：(1)取黑暗链霉菌孢子至无菌水中，混合均匀，制得活跃链霉菌孢子悬液；(2)将步骤(1)制得的黑暗链霉菌孢子悬液转接至灭菌后的培养皿中，无菌风吹干，制得菌膜，然后进行低能离子束的注射诱变，靶室真空度为6.0～8.0×10‑3Pa，注射脉冲剂量设定为70～90×2.6×1014ions/(cm2·s)，注射完成后，再进行紫外照射28～32s，紫外灯管功率为15W，照射距离28～32cm，然后使用无菌水洗涤后涂布平板培养基，36～38℃培养7～8天，制得单菌落；(3)将步骤(2)中制得的单菌落，接入孔板内的孔板培养基中，在36～38℃震荡培养5～6天，制得培养液；(4)将步骤(3)中获取的培养液，转接至含枯草芽孢杆菌的生测培养基平板中进行抑菌检测，36～38℃培养16h，选取抑菌圈直径大于15mm的单菌进行复筛。