[发明专利]一种用于检测人血清中超氧化物歧化酶含量的方法

摘要

本发明涉及一种用于检测人血清中超氧化物歧化酶含量的方法——胶乳免疫比浊法，该方法中提供的试剂包括磷酸盐缓冲液、稳定剂、偶联剂、防腐剂、抗人超氧化物歧化酶抗体的胶乳微球。该检测方法稳定性和线性好，特异性强，分析灵敏度高，操作简便等优点，可用于临床中常用的全自动生化分析仪。

主权项

1.一种检测超氧化物歧化酶含量方法所用的检测试剂，其特征包括试剂R1和试剂R2，所述试剂R1和试剂R2的组成如下：试剂R1中含有试剂R2中含有所述抗人超氧化物歧化酶抗体的胶乳微球的制备步骤包括：(1)、每ml反应混合物加入下列各物：a.去离子水是最后容积为1.0mL；b.0.1mL的5x的贮备缓冲溶液，其pH值为7.5，所述的5x的贮备缓冲溶液采用0.5M MES缓冲溶液；胶乳微球最终浓度为5％(W/V)；c.按照二者呈现的0.1∶0.8～1∶2的比例范围加入20mg/ml的NHS去离子水溶液和15mg/mL的EDAC去离子水溶液；(2)、在室温将此混合物反应30min，不断搅拌；(3)、用上述的MES缓冲液，除去未反应的NHS和EDAC；(4)、重新将胶乳微球在去离子水中悬浮，使其浓度为5％(w/v)；(5)、将结合的蛋白质溶于MES缓冲溶液中，浓度为1mg/mL；(6)、将上述物质轻轻搅拌至少2h；(7)、按1mL反应混合液加入5μL乙醇胺混合，轻轻搅拌反应10分钟；(8)、除去未结合的蛋白质和乙醇胺，贮于贮存缓冲溶液中。