[发明专利]一种检测海洋生物体内塑料含量的方法

摘要

本发明公开了一种检测海洋生物体内微塑料含量的方法，其特征在于：所述的方法按照以下步骤进行：取海洋生物消化道或肌肉组织烘干破碎，消解，然后对消解液进行密度梯度离心，对获得的离心液中的微塑料采用荧光显微镜和傅里叶变换红外显微镜进行镜检，统计微塑料的数量。这是一种操作简单、准确性高、应用安全性高且适用于海洋生物微塑料污染检测的方法。

主权项

1.一种检测海洋生物体内塑料含量的方法，其特征在于：首先取被测海洋生物的肌肉组织或从食道到肛门括约肌之间的消化道组织，称重后记录生物组织质量，并将其在烘箱中于60℃条件下恒温烘干，将烘干至恒重后的生物组织在石英研钵中破碎，破碎后保证其粒径范围是5‑10mm，称取粉碎后的生物组织5‑10g样品加入500ml的玻璃烧杯中，加入25‑50ml浓度为65%的浓硝酸，于电热板上煮沸消解30min，加热温度的范围是90‑100℃，在加热的过程中逐滴向烧杯中加入浓度为30%的双氧水，直至获得透明溶液，然后利用浓度为10%的NaOH溶液调节透明溶液的pH值至中性，获得消解液，将上述消解液利用等密度区带离心法处理，分离出不同密度的微塑料，具体操作步骤如下：首先在离心管中预先放置梯度介质密度为1.36g/cm3的蔗糖溶液，然后将消解液放在梯度介质的液面上，或者预先将消解液与密度为1.36g/cm3的梯度介质混合后放入离心管中，将上述的离心管放入离心机中，在转速4000转/min 的条件下离心处理10‑15min，形成不同密度梯度溶液层，不同密度的微塑料可以实现分离，从离心处理后的离心管中定量获取离心液，并在荧光显微镜下镜检、分离出能够发出荧光的微塑料，进行计数，在全自动傅里叶变换红外光谱显微镜下镜检、分离出不能发出荧光的微塑料，进行计数；可以获得不同密度微塑料的数量，将上述两次计数结果相加，除以初始的生物组织质量，获得单位质量内海洋生物体内的塑料含量，结果计算：生物体内微塑料浓度=（（n1+n2）×V）/mn1：荧光显微镜下统计的微塑料数量，单位为个，n2：傅里叶变换红外光谱显微镜下统计的微塑料的数量，单位为个，V：消解后获得的消解液的体积，单位为ml，m：消解称取的生物组织重量，单位为g。