[发明专利]一种提取猪蛔虫受精卵基因组DNA的方法在审
| 申请号： | 201610850427.X | 申请日： | 2016-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN106434629A | 公开（公告）日： | 2017-02-22 |
| 发明（设计）人： | 周春花;邓仕标;石琴华 | 申请（专利权）人： | 南昌大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 南昌新天下专利商标代理有限公司36115 | 代理人： | 施秀瑾 |
| 地址： | 330031 江西省*** | 国省代码： | 江西;36 |
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| 摘要： | 一种高效提取猪蛔虫受精卵基因组DNA的方法，包括蒸馏水洗虫卵、预处理虫卵、蛋白酶K消化、除杂质、高纯水洗脱DNA等五个步骤。本发明提取的猪蛔虫受精卵基因组DNA，质量稳定，能有效地进行下游PCR扩增，为猪蛔虫的分子流行病学、遗传多样性、遗传结构、系统发生学、谱系地理学研究提供重要的技术方法，该发明对猪蛔虫病的分子诊断和防控也有重要意义。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提取 蛔虫 受精卵 基因组 dna 方法 | ||
【主权项】：
一种高效提取猪蛔虫受精卵基因组DNA的方法，其特征是包括以下步骤：（1）蒸馏水洗虫卵：用离心管，加入蒸馏水和虫卵，3200rpm漩涡震荡1‑2min后，10000r/min离心2‑5min，弃上清液，如此反复3次；（2）预处理虫卵：将离心管于100℃沸水和‑80℃或液氮中交替放置lmin，经过6‑9次的反复充分冻融后，在离心管中加入研磨球后，水平放在漩涡震荡仪上3200rpm 震荡10‑15min，10000r/min离心30sec，转移上清液至1.5ml或2ml离心管中；（3）蛋白酶K消化：在上述离心管中加入核酸裂解液220μl，0.5M EDTA、pH8.0、50μl，蛋白酶K、50mg/ml、20μl，56℃恒温消化10‑12小时；（4）除杂质；（5）高纯水洗脱DNA。
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