[发明专利]一种泰乐菌素高产菌株的高通量筛选方法在审

专利信息
申请号: 201610828458.5 申请日: 2016-09-18
公开(公告)号: CN106244458A 公开(公告)日: 2016-12-21
发明(设计)人: 周景文;陈坚;曾伟主;曹晓梅;堵国成 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N1/02 分类号: C12N1/02;C12N13/00;C12N15/01;C12R1/54
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司23211 代理人: 耿晓岳
地址: 214122 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种泰乐菌素高产菌株的高通量筛选方法,属于微生物生产技术领域。本发明建立了一种新型的高通量筛选的方法。本发明方法有效提高了孢子生长速度,有效提高了后续筛选效率。同时,本发明通过对进行优化,得到了线性关系好的检测方法,有效提高了筛选的效率和准确性,防止了提取效果不佳导致的筛选准确性不足的问题。
搜索关键词: 一种 菌素 高产 菌株 通量 筛选 方法
【主权项】:
一种泰乐菌素高产菌株的高效筛选方法,其特征在于,所述方法主要包括步骤如下:(1)将待筛选的弗氏链霉菌菌悬液涂布在固体平板培养基上,待孢子成熟后挑选接种于装有种子培养液的96浅孔板中培养;(2)将96浅孔板中得到的种子液平行转接至装有发酵培养液的48孔板中发酵培养;(3)发酵结束后,离心取菌体,吸取上清液用0.1mol/LHCl稀释至泰乐菌素浓度为0~330μg/mL,然后取稀释液200μL稀释液于96酶标板,酶标仪测定OD290值,根据y=0.0116x+0.0414(其中,x为泰乐菌素浓度(μg/mL),y为OD290nm)计算得到泰乐菌素浓度,进而根据稀释倍数换算得到发酵液的泰乐菌素浓度,即得到产泰乐菌素相对较高的菌株。
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