[发明专利]一种微载体的再生方法及其应用有效
| 申请号： | 201610817514.5 | 申请日： | 2016-09-13 |
| 公开（公告）号： | CN106434528B | 公开（公告）日： | 2019-09-13 |
| 发明（设计）人： | 原国强;马小伟;郭宏庄;潘若文;邢建中;马兰 | 申请（专利权）人： | 华兰生物工程股份有限公司;华兰生物疫苗有限公司;华兰基因工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;C12N11/08;C12N11/10 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;白艳 |
| 地址： | 453003 *** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种微载体的再生方法及其应用。本发明的方法是将微载体用胰蛋白酶溶液或胶原酶溶液消化后，再用等渗PBS溶液冲洗，即可实现微载体的高效再生。与现有技术相比，本发明没有使用酸、碱等可能引起微载体结构破坏的试剂，且再生的微载体培养效果与新微载体基本一致，再生率可达到95％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 载体 再生 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
1.一种微载体的再生方法，由如下步骤组成：1）预漂洗的步骤：所述预漂洗为将使用过的微载体与PBS溶液混匀，搅拌，收集沉淀即得到预漂洗后的微载体；所述使用过的微载体与所述PBS溶液的体积比为1:（1‑5）；2）用酶液消化使用过的微载体，以实现微载体再生；所述用酶或酶液消化使用过的微载体为将所述使用过的微载体、PBS溶液和酶液混匀，反应，收集沉淀即得到消化后的微载体；所述使用过的微载体、所述PBS溶液与所述酶液的配比为1kg:（1‑3）L:（1‑6）L；所述酶为胰蛋白酶；所述酶液为胰蛋白酶溶液；所述胰蛋白酶溶液中胰蛋白酶的质量分数为0.125 %；3）消化后漂洗的步骤：所述漂洗为将所述消化后的微载体与PBS溶液混匀，搅拌，收集沉淀即得到再生后的微载体；所述消化后的微载体与所述PBS溶液的体积比为1:（1‑10）；所述微载体为Cytodex 1。
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