[发明专利]一种生物技术提升再造烟叶香气品质的方法

摘要

本发明提供一种生物技术提升再造烟叶香气品质的方法，包括如下步骤：(1)菌株活化：将桑肠杆菌(Enterobacter mori)VL4‑3接种到斜面培养基上，再接种到种子培养基，转接制得种子培养液；(2)复合生物转化预处理：在再造烟叶的萃取工序，将步骤(1)所述的种子培养液接种到再造烟叶水溶液中，并添加丁酸杆菌阿魏酸酯酶、木质素过氧化物酶(Lip和锰过氧化物酶MnP)复合酶，搅拌混合均匀，发酵得到再造烟叶生物转化液；(3)经再造烟叶常规工序生产再造烟叶，在此过程中，温度超过75℃，本发明的酶和菌失活，卷制得到再造烟叶。本发明生产的生物技术提升香气品质的再造烟叶，刺激性降低、青杂气减少、香气丰富优美、具有奶甜香气，提升再造烟叶香气品质。

主权项

一种生物技术提升再造烟叶香气品质的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)菌株活化：将桑肠杆菌(Enterobacter mori)VL4‑3接种到马铃薯葡萄糖琼脂斜面培养基上，在25～35℃、pH5～9条件下，静置培养24～72h后得到斜面培养物，再接种到种子培养基，在25～35℃，转速100～150rpm/min条件下振荡培养12～36h，连续转接1～3次后制得种子培养液；所述的桑肠杆菌(Enterobacter mori)VL4‑3保藏号为CCTCCNO：M2012020，于2012年2月16日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心；所述的斜面培养基：马铃薯浸液200mL/L，葡萄糖20g/L，琼脂13g/L；所述的种子培养基：麦芽糖50g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠5g/L；(2)复合生物转化预处理：在再造烟叶的萃取工序，将步骤(1)所得的种子培养液按质量比2～10％接种到再造烟叶水溶液中，并添加占再造烟叶质量比的0.15～0.4％的丁酸杆菌阿魏酸酯酶、木质素过氧化物酶复合酶，搅拌混合均匀，在pH至4.5～6.0，在35～45℃条件下，发酵1～12小时，得到再造烟叶生物转化液；(3)再造烟叶常规生产工序：所述步骤(2)所得的再造烟叶生物转化液，在55～65℃、pH自然条件下萃取反应40～60min，碟螺离心分离液渣，将萃取液75～85℃下真空浓缩至固含量40％，得到浓缩液，在此过程中，温度超过70℃，本发明的酶和菌失活；而残渣则通过用干燥机实施100～120℃干燥处理，灭活酶和菌，制成一定的水含量的烟草基片，将浓缩液喷涂到烟草基片上卷制成提升香气品质的再造烟叶。