[发明专利]一种脐血间充质干细胞培养试剂盒的制备方法

摘要

本发明属于医药生物技术领域，涉及一种脐血间充质干细胞培养试剂盒的制备方法，其特征在于所述的试剂盒由独立包装的如下组分组成，1瓶细胞培养液A（95 ml），1瓶细胞培养液B（5 ml）和1瓶细胞洗涤液（100 ml）。本发明脐血间充质干细胞培养试剂盒能够提高脐血间充质干细胞原代细胞传代时间，并保持脐血间充质干细胞多次传代后依然保持其细胞的全能性，而且降低了免疫原性并增强了使用安全性。

主权项

一种脐血间充质干细胞培养试剂盒的制备方法，其特征在于：所述的试剂盒由独立包装的如下组分组成，1瓶细胞培养液A95 ml，1瓶细胞培养液B5 ml和1瓶细胞洗涤液100 ml，细胞培养液A的制备：首先，打开呈现粉末状的DMEM培养基，并称取3.7 g NaHCO3，一同加入到800 ml三蒸水中，搅拌至溶解，再加入100 U/ml青霉素和100 mg/ml链霉素，随后pH调至7.2‑7.4，再用0.22 μm 滤器过滤除菌，并用无菌水补至1000 ml，最后混匀，4 ℃保存，待用；细胞培养液B的制备：收集某医院新鲜采集、经检测达到临床用血标准的多人份机采血小板，使其浓度为1.0×1012细胞/L，将所获样本置‑80 ℃冰箱过夜，次日使其置于37 ℃水浴至融，这一过程反复5次，4 ℃，3000 r/min，离心30 min，取上清液，0.22 μm过滤，并添加含有5 % 10 U/ml 肝素钠的DMEM培养基。