[发明专利]高效液相质谱联用测定血浆中氯氮平浓度的方法

摘要

本发明公开了一种高效液相质谱联用测定血浆中氯氮平浓度的方法，分别取100μL标准血浆样品，加入500μL含内标利培酮的甲醇溶液沉淀蛋白，涡旋后离心，取上清液，加超纯水稀释一倍并混合均匀后在高效液相质谱联用仪上进样分析，以氯氮平峰面积和内标峰面积比值为纵坐标，以标准血浆样品中氯氮平的浓度为横坐标绘制标准曲线；取100μL待测血浆样品，加入500μL含内标利培酮的甲醇溶液沉淀蛋白，涡旋后离心，取上清液，加超纯水稀释一倍并混合均匀后在高效液相质谱联用仪上进样分析，测得氯氮平峰面积和内标峰面积比值并根据标准曲线得到待测血浆样品中氯氮平的浓度。本发明方法经验证血浆中氯氮平浓度在23.92～2296ng/mL的范围内具有良好的线性关系，准确度高且精密度好。

主权项

1.高效液相质谱联用测定血浆中氯氮平浓度的方法，其特征在于具体步骤为：步骤（1）、在氯氮平浓度为23.92～2296ng/mL的范围内分别配制不同浓度的氯氮平甲醇溶液作为标准溶液，分别吸取100μL标准溶液置于离心管中，在氮气氛围下吹干，再分别加入100μL空白血浆得到标准血浆样品，分别取100μL标准血浆样品，加入500μL含内标利培酮的甲醇溶液沉淀蛋白，涡旋后离心，取上清液，加超纯水稀释一倍并混合均匀后在高效液相质谱联用仪上进样分析，以氯氮平峰面积和内标峰面积比值为纵坐标，以标准血浆样品中氯氮平的浓度为横坐标绘制标准曲线；步骤（2）、取100μL待测血浆样品，加入500μL含内标利培酮的甲醇溶液沉淀蛋白，涡旋后离心，取上清液，加超纯水稀释一倍并混合均匀后在高效液相质谱联用仪上进样分析，测得氯氮平峰面积和内标峰面积比值并根据标准曲线得到待测血浆样品中氯氮平的浓度；其中，液相条件：Agilent Elipse XDB‑C18色谱柱，流动相为溶液B和溶液A梯度洗脱，梯度设置为0.01～3.00min，100V%～20V%溶液A；3.00～5.50min，20V%溶液A；5.50～6.00min，20V%～100V%溶液A；6.00～8.50min，100V%溶液A，其中溶液A为甲醇，溶液B为50V%甲醇水溶液，该溶液B中含有6mmol/L的乙酸铵，流速1mL/min，进样量10μL，柱温30℃；质谱条件：离子源为ESI，正离子模式下以MRM进行扫描，CAD 6psi，CUR 10psi，GS1 50psi，GS2 80psi，IS 3500v，TEM 400℃，氯氮平选择离子对m/z 327.3>270.0，DP 55v，EP 12v，CE 29v，CXP 13v；利培酮选择离子对m/z 411.3>191.1，DP 55v，EP 12v，CE 29v，CXP 13v；Dwell time均为175ms。