[发明专利]一种开放式培养甘蔗组培苗的方法

摘要

本发明涉及一种植物种苗培育方法，具体涉及一种开放式培养甘蔗组培苗的方法，属生物技术领域。开放式培养甘蔗组培苗的方法包括培养设备选用及消毒、抑菌剂制备、组培苗诱导培养、增殖培养、生根培养。本发明简化了组培苗生产操作，只在培养基中加入抑菌剂，接种、培养可在有菌环境条件下进行；工作效率大大提高，降低生产成本，有利于组培苗推广应用；组培苗繁育过程处于开放状态，其光合和呼吸能力得到加强，组培苗素质好；培养基营养液以雾化方式附在组培苗植株表面，组培苗生长氧气充足，同时减少了酚代谢物对组培苗的伤害。

主权项

1.一种开放式培养甘蔗组培苗的方法，包括培养设备选用及消毒、抑菌剂制备、组培苗诱导培养、增殖培养、生根培养，其特征在于：（1）培养设备选用及消毒：诱导培养使用培养瓶，增殖、生根培养使用带孔穴的育苗盘；培养设备在使用前用浓度为0.05%～0.10%的次氯酸钠水溶液浸泡7～8小时备用；（2）抑菌剂制备：按重量份，取鼠尾草新鲜成熟叶片15～25份、迷迭香新鲜成熟叶片10～20份、成熟蒜头45～55份、蒸馏水5份、肉桂新鲜成熟叶片10～15份，经充分粉碎后提取过滤液；（3）诱导培养：取健康无病的甘蔗新植蔗株，砍成单芽段,在30～35 ℃条件下培养10～20天，待蔗芽萌发长成8～10cm高，用体积比为 75%的酒精对蔗苗进行表面消毒；剥离外层叶鞘，取含生长点 0.1～0.3cm长的芽尖分生组织，接种到诱导培养基，培养40～60天长成3～5株丛芽；所述诱导培养基为MS＋6‑BA1.5～2.0 mg/L＋NAA0.1～0.5mg/L＋蔗糖30g/L+抑菌剂；（4）增殖培养：诱导培养长成丛芽后，将丛芽分成3～5株小丛，每个育苗盘的孔穴放置1小丛，培养基为增殖培养基，培养一段时间待苗长满穴孔后，按上述方法对丛芽分小丛芽继续培养；所述增殖培养基为MS＋6‑BA1.0～1.5 mg/L＋NAA0.1～0.5mg/L＋蔗糖30g/L+抑菌剂；（5）生根培养：组培苗长满穴孔后应用生根培养基进行培养，10～20天组培苗长出根系，然后移出培养室假植；所述生根培养基为1/2MS+NAA 5mg/L+蔗糖 50 g/L+抑菌剂；所述各培养基中，抑菌剂的添加量为培养基体积比的0.4%～0.8%；培养设备还包括喷雾系统，所述喷雾系统包含营养液罐、空气压缩机、时控开关、水管、喷雾装置；所述诱导培养液、增殖培养液、生根培养液置于营养液罐内，喷雾装置安装在育苗盘上方20～30cm处；培养液喷雾持续时间为5～7秒，喷雾间歇时间为0.5～0.7小时。