[发明专利]一种克服陆地棉-特纳氏棉双二倍体与陆地棉杂交不亲和性的胚拯救方法

摘要

本发明公开一种克服陆地棉‑特纳氏棉双二倍体与陆地棉杂交不亲和性的胚拯救方法，包括以下步骤：1)陆地棉与陆地棉‑特纳氏棉双二倍体杂交；2)滴涂赤霉素：授粉当天在苞叶处滴涂赤霉素水溶液；3)胚珠培养；4)幼苗嫁接：将步骤3)中培养的幼苗嫁接到海岛棉砧木上。本发明的方法有效地防止铃过早脱落，有效地避免了幼胚的过早夭折，成功地获得了陆地棉‑特纳氏棉双二倍体与陆地棉的杂交后代，获得了陆地棉‑特纳氏棉的五倍体(倍半二倍体)材料，其育性较双二倍体有了较大提高，并将该五倍体成功与陆地棉亲本进行了回交，得到了回交后代群体，为实现该棉种的育种利用奠定了基础。

主权项

1.一种克服陆地棉-特纳氏棉双二倍体与陆地棉杂交不亲和性的胚拯救方法，其特征在于包括以下步骤：1）陆地棉与陆地棉-特纳氏棉双二倍体杂交：以陆地棉为母本，将其开花前一天下午人工去雄，并防止外源花粉污染授粉，开花当天授以人工合成的陆地棉-特纳氏棉双二倍体的花粉；2）滴涂赤霉素：授粉当天开始在苞叶处滴涂赤霉素水溶液；3）胚珠培养：取授粉后3天的杂交铃清洗消毒后取出胚珠接种于初始培养基上进行暗培养，暗培养60天后将胚珠转移到萌发培养基MSB上进行光培养；光培养30天后将胚珠中的胚剥离放在生长培养基上萌发；15天后放在生根培养基上生根，2天后将幼苗转移到幼苗培养基上培养；所述的初始培养基为：MSB+10g/L蔗糖+1.9g/L KNO3+0.5mg/L KT+300mg/L CH；所述的萌发培养基为：MSB培养基所述的生长培养基为：MSB+1.0mg/L KT；所述的生根培养基为：MSB+0.5mg/L NAA+1.0g/L AC；所述的幼苗培养基为：添加30g/L葡萄糖代替30g/L蔗糖的MSB；4）幼苗嫁接：将步骤3）中培养的幼苗嫁接到海岛棉砧木上；所述赤霉素水溶液的浓度为50ppm，连续滴涂3天；步骤3）中所述暗培养的条件为：26±2℃，30天继代一次；步骤3）所述光培养整个过程的条件为：16小时光照8小时黑暗，温度是26±2℃，光照强度是1600～2000lux。